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1.2材料飞蓬干燥全草（采自长白山，经长春中医药大学邓明鲁教授鉴定）；野黄芩苷对照品，芦丁标准品（供含量测定用）购于中国药品生物制品检定所；其余试剂均为分析纯。
2方法与结果
2.1飞蓬总黄酮含量测定
2.1.1对照品溶液制备精密称取干燥至恒重的无水芦丁对照品5.05mg置于25ml容量瓶中，加适量70%的乙醇超声处理5min，用乙醇定容至刻度，摇匀，得浓度为0.202mg/ml的对照品储备液。
2.1.2供试品溶液制备精密称取样品干燥粉末1g，置于50ml容量瓶中，加适量70%的乙醇超声处理5min，用乙醇定容至刻度，摇匀，作为供试品液。
2.1.3测定波长选择精密吸取芦丁对照品溶液0.5ml和样品溶液1ml于具塞试管中，精密加入5%亚硝酸钠溶液0.3ml，摇匀，放置6min，再加入10%硝酸铝0.3ml，摇匀，放置6min，加4%NaOH溶液4ml，用70%的乙醇定容至10ml，摇匀，放置10～15min。以相同试剂为空白。在400～900nm波长范围内扫描，记录最大吸收波长为510nm，见图1。
图1芦丁和飞蓬样品最大吸收波长图
2.1.4标准曲线制作精密吸取标准芦丁溶液0.0，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml分别加入6支具塞试管中，按照“2.1.3”项操作，于510nm处测定吸光度。并以吸光度（A）为纵坐标，芦丁对照品溶液浓度（C,mg/ml）为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：A＝11.227C-0.013，r＝0.9999（n=6），见图2。结果表明：在0.101～1.01mg范围内芦丁对照品显色后的吸光度与浓度呈良好线性关系。
图2芦丁标准曲线图
2.1.5供试品含量测定取供试品溶液0.2ml于具塞试管中，按照“2.1.3”项下操作，于510nm处测定吸光度,然后根据线性方程计算其总黄酮的含量。
2.2飞蓬灯盏乙素含量测定
2.2.1色谱条件ChmmasilC18柱(5μm，4.6mm×150mm)；测定波长λ＝335nm（依卫生部颁发的药品标准）；流动相：甲醇－0.1％磷酸（40：60）；流速1.0ml／min。
2.2.2对照品溶液制备精密称取野黄芩苷对照品1.05mg，置10ml容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，过滤，摇匀，制成浓度为0.105mg/ml的标准储备液。
2.2.3供试品溶液制备精密称取样品干燥粉末1g，置于50ml容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，过滤，摇匀，作为供试品液。
2.2.4标准曲线制作精密量取对照品溶液2，4，6，8，10，12，14，16μl注入液相色谱仪，测定野黄芩苷色谱峰的面积。并以吸收峰面积（A）为纵坐标，进样量（C,μg）为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：A=1359349.2409C-68257.6517，r=0.9999（n=8），结果表明野黄芩苷浓度在0.21～1.68μg范围内与峰面积具有良好的线性关系。
2.2.5供试品含量测定精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得，见图3。
2.3.1提取溶剂的优选称取100g飞蓬，分别加入14倍量不同的提取溶剂，80℃水浴恒温提取2h，抽滤，定容，分别按“2.1”测定总黄酮含量，按“2.2”项中方法测定灯盏乙素含量，结果见表1。表1不同提取溶剂的总黄酮和灯盏乙素含量
从表1可知，碱液提取虽然得膏率很高，但是总黄酮和灯盏乙素含量低，且碱液提取加热容易破坏黄酮类化合物的母核。用水和乙醇作为提取溶剂，虽然得膏率相同，但是水提取的总黄酮和灯盏乙素含量较低，且由于其极性大，易把蛋白质、糖类等溶于水的成分浸提出来，使得提取液存放时，易腐败变质。乙醇提取的总黄酮和灯盏乙素含量高，因此为这3种溶剂中的最佳提取溶剂。下面的实验均采用乙醇作为提取溶剂，分别选取乙醇浸渍法、渗漉法、回流提取法、索氏提取法、超声波法进行提取。
2.3.2提取方法的优选称取100g飞蓬，分别选取乙醇浸渍法、渗漉法、回流提取法、索氏提取法、超声波法进行提取，提取液抽滤，定容，分别按“2.1”项中方法测定总黄酮含量，按“2.2”项中方法测定灯盏乙素含量。不同方法提取的飞蓬总黄酮和灯盏乙素含量测定结果见表2。表2不同提取方法的总黄酮和灯盏乙素含量
经过实验证明，不同提取方法直接影响着醇提工艺中的总黄酮和灯盏乙素的测定结果。综合考虑，用回流法提取飞蓬中的总黄酮和灯盏乙素是比较合适的方法。为此，设计正交，进一步优化采用乙醇回流法进行提取的最佳醇提工艺。
2.3.3正交实验法优选飞蓬乙醇回流提取工艺根据实际情况，选择乙醇浓度、溶媒量、提取时间、提取次数作为考察因素，每个因素选择3个水平，因素水平表见表3。表3正交实验设计因素水平按均匀取样的规则取飞蓬100g，按L9（34）正交实验表安排实验，每组两次平行实验，以总黄酮和灯盏乙素含量为评价指标，测定结果取平均值。结果见表4。表4正交实验方案与结果表5方差分析
以总黄酮提取率为考察指标，直观分析结果表明A2>D3>C1>B2；以灯盏乙素提取率为考察指标，直观分析结果表明A2>D3>C3>B3，方差分析（表5）结果表明A因素和D因素对总黄酮及灯盏乙素的提取均具有显著性影响，而B因素及C因素对提取结果没有影响，为了节省时间和能源，最终确定工艺条件为A2B1C1D3，即以70%乙醇回流提取3次，1h/次，加醇量为每次14倍量。
2.4验证实验称取药材按最佳工艺进行验证实验，结果表明总黄酮和灯盏乙素含量与正交实验结果吻合，取得较好的结果，说明该工艺可行。
3讨论［4］
目前，提取工艺筛选试验中常用化学法、生物学法及有效浸出物综合评价的方法，因此实验中仅用一种评价指标筛选提取工艺条件往往不够全面。而且飞蓬中含有多种黄酮类化合物，采用紫外分光光度法测得结果通常是总黄酮的含量，并不能准确反映灯盏乙素的含量，本实验经研究建立了灯盏乙素含量测定的HPLC法，提高了准确度，稳定可靠。
在实验中，曾试用了甲醇－0.5％磷酸溶液(45∶55)、甲醇－1％磷酸溶液(35∶65)、乙腈－1％冰醋酸(25∶75)为流动相条件，经反复比较，以正文所选流动相重复性最佳，出峰时间较快，峰形尖锐、对称，且灯盏乙素主峰与杂质峰明显分离。
通过L9（34）正交实验，最终确定了飞蓬中总黄酮和灯盏乙素醇提工艺的最佳条件，并通过验证实验证明该工艺，稳定可靠，有效富集了飞蓬中总黄酮和灯盏乙素的含量，为进一步开发飞蓬中总黄酮有效部位奠定基础。
【参考文献】
［1］林容,陈艺林.中国飞蓬属及其邻属的研究［J］.植物分类学学报,1973,11：399.
［2］吉林省中医中药研究所,长白山自然保护区管理局,东北师范大学生物系.长白山植物药志［M］.长春：吉林人民出版社，1982：1177.
［3］胡宇慧,张浩,张志锋.飞蓬属多种植物的化学成分含量研究［J］．药物分析杂志,2005,25(1)：21.
牡丹皮为毛茛科植物牡丹(PaeoniasuffruticosaAndr.)的干燥根皮，具有清热凉血，活血化瘀的功效。牡丹根皮中含芍药苷、氧化芍药苷、苯甲酰芍药苷、丹皮酚、丹皮酚苷、丹皮酚原苷和丹皮酚新苷等成分。药理实验表明，芍药苷体内、体外均能抑制ADP或胶原诱导的血小板聚集［1］，应属牡丹皮抗缺血性中风的主要有效成分之一。本文采用正交实验法，以HPLC法测定的芍药苷的提取量为指标，对牡丹皮乙醇提取工艺进行优选，为牡丹皮的开发应用提供了实验依据。
1仪器和试药
高效液相色谱仪：日本岛津10Avp高效液相色谱仪(LC10Atvp双泵，SPDM10Avp二极管阵列检测器，SIL10Advp自动进样器，CTO10Avp柱温箱);HypersilODS填料色谱柱(ID4.6×250mm)(大连依利特化学仪器有限公司);分析天平：LIBRORL16ODTP分析天平(日本岛津)、AE240分析天平(瑞士METTLER);芍药苷对照品(07369710)：中国药品生物制品检定所(为含量测定用)。牡丹皮药材(购自四川省电江药材基地，经鉴定为牡丹皮正品)，所用乙腈为色谱纯，其余试剂为分析纯。
2提取工艺研究
2.1方法本文采用乙醇加热回流法对牡丹皮进行提取，选择回流次数、乙醇浓度、回流时间和乙醇用量等4个主要影响因素，每个因素选取3个水平。选用L9(34)正交实验法进行实验，选定的因素水平表见表1。
表1因素水平表（略）
2.1.1色谱条件经试验，确定流动相为乙腈水(20：80)，流速1ml/min，柱温40℃，测定波长为230nm进样量4μl。
2.1.2对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品2.40mg，置25ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml中含芍药苷96μg)。
2.2供试样品溶液的制备精密称取9份牡丹皮药材粗粉50g，按L9(34)表各试验号规定方法进行实验，提取液分别浓缩并转移至100ml容量瓶，用适量乙醇稀释至刻度，摇匀，静置，即得样品溶液。精密吸取上述样品溶液各1ml，分别置25ml容量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，即得供试样品溶液。
2.3供试样品溶液测定及结果精密吸取供试样品溶液与对照品溶液各4μl，注入液相色谱仪，测定，计算出供试样品溶液中芍药苷的浓度，结果见表2；方差分析见表3。
表2正交试验设计及结果（略）
由以上结果可知，牡丹皮乙醇提取的最佳工艺条件确定为A3B2C1D1，即5倍量75%乙醇提取3次，每次1h。
表3方差分析（略）
3小结
3.1芍药苷为牡丹皮中主要活性成分之一，其含量测定方法较多，如毛细管区带电泳法［2］，薄层扫描法［3］，高效液相色谱法［4-5］等。笔者采用HPLC法进行实验，并进行了相应的方法学试验。结果表明本法各方面符合中华人民共和国药典(2005版)和中药新药研制的有关规定。在试验中，根据牡丹皮含量测定结果，制定了牡丹皮中芍药苷的含量限度，为控制实验用牡丹皮药材的质量提供了依据。本文所选含量测定方法操作简单，结果准确，重现性好。
3.2关于芍药苷含量测定方法中流动相的选择，曾选用乙腈水(10：90、20：80、30：70)和甲醇水(20：80、30：70、40：60)等依次进行实验，结果显示乙腈水(20：80)作流动相时，牡丹皮供试品色谱中芍药苷与杂质峰可达基线分离，峰形对称，且保留时间适宜，故采用乙腈水(20：80)作为流动相。
3.3有文献记载以水提醇沉法提取丹皮中芍药苷［6］，但考虑到芍药苷醇溶性优于水溶性，在前期实验中经比较，水提醇沉提取物中芍药苷得率低于乙醇提取物，且其操作较繁，故本文直接采用乙醇提取法，正交实验得出最佳提取工艺条件为乙醇浓度75%，乙醇用量为药材量的5倍，加热回流时间为1h，回流次数为3次。
致谢；河南省驻马店市药品检验所
【参考文献】
［1］洪涛，张家勋，李嘉珏，等.中国野生牡丹研究(一)［J］.中草药,1994,(4):16.
［2］沈保安.药材牡丹皮的原植物·芍药属一新种［J］.植物分类学报，1997，35(4):360.
［3］洪德元，潘开玉，谢中稳.银屏牡丹·花王牡丹的野生近亲［J］.植物分类学报，1998，36(6):515.
Abstract:［Objective］TofilterandoptimizeextractivetechnologyofQianlieninggranules.［Methods］TheoptimizationextractivetechnologyofQianlieninggranuleswasinvestigatedusingorthogonaldesignwiththeavailabilitycomponentextractingfromthedrugastheindex.［Results］TheoptimalconditionfortheextractionofRadixAstragaligroupwas10foldsamountofwater，3times,1.5hourseachtime.TheoptimalconditionfortheextractionofRheumofficinalBaill.groupwas6foldsamountof60%alcohol,2times,twohoursand1.5hourseachtime.［Conclusion］Theoptimizedextractivetechnologyisscientificandefficient.
Keywords：QianlieningGranules；Rhein；AstragalosideIV；extractivetechnology；orthogonaldesign
前列宁颗粒由酒大黄、黄芪、牛膝、菟丝子等多味中药组成，为我院中西医结合系洪振丰教授的经验方，具有清热解毒、活血化瘀、益气补肾之功效，用于治疗慢性前列腺增生及前列腺炎等症，疗效显著［1］。为方便临床用药和患者携带，实验对组方成分进行分析，根据各味药材所含成分的理化性质，拟分水溶和醇溶两组提取。其中黄芪、菟丝子等药采用水煎煮提取，酒大黄、牛膝等药采用醇提，对其提取工艺采用正交实验法进行研究，以确定最佳提取工艺，使制剂工艺更加合理。
1仪器与试药
美国Waters600E高效液相色谱仪，包括二极管阵列检测器，四元泵，在线真空脱气机，Millennium32色谱工作站；SartoiousBT25S型电子分析天平（北京赛多利斯仪器有限公司）；恒温干燥箱(北京市朝阳区来广营医疗器械厂)；DKS24型电热恒温水浴锅(上海精宏试验设备有限公司)。
酒大黄、黄芪等实验药材均购自福建同业有限公司，经我院药学系鉴定符合2005版中国药典（一部）有关规定；大黄酸对照品（批号0757-200206，购自中国药品生物制品检定所）；黄芪甲苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号：110781-200512)；甲醇、乙腈为色谱纯，水为超纯水，其余试剂为分析纯。
2方法与结果
2.1水煎煮组正交试验设计
采用正交试验法对黄芪、菟丝子等药组水煎液提取工艺进行优选。根据文献报道［2］，以提取次数(A)、提取时间(B)、加水量(C)为试验因素，每个因素3个水平进行优选，以浸膏得率和黄芪甲苷含量作为考察指标进行试验。因素水平见表1。表1水煎煮组的因素水平表（略）
浸膏得率测定：精密吸取母液20ml，置干燥恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，于105℃下干燥3h，迅速取出，放入干燥器中，冷却30min，迅速精密称定，计算出膏率。
2.2水煎液中黄芪甲苷的测定［3］
2.2.1色谱条件与系统适用性试验
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(38:62)为流动相；流速为1.0ml/min。蒸发光散射检测器检测。此色谱条件下，理论塔板数按黄芪甲苷峰计算，应不得低于4000。
2.2.2对照品溶液的制备
精密称取黄芪甲苷对照品4.0mg，置于10ml容量瓶中，加入甲醇定容，制成0.4mg/ml的溶液，即得。
2.2.3供试品溶液的制备
按正交表条件提取，合并提取液，滤过，滤液浓缩至1:1（g/ml），加乙醇使醇浓度达75％，低温静置24h，取上清液减压回收乙醇，浓缩定容于100ml量瓶，摇匀。分别精密量取20.0ml，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次25ml，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤3次，每次20ml，正丁醇提取液回收溶剂至干，残渣加甲醇溶液并转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，离心，取上清液，即得。
2.2.4标准曲线绘制
精密吸取对照品溶液2，4，6，8，10μL，分别注人高效液相色谱仪，依法测定。回归方程为Y=7985.56X+1457.24，r=0.9998。结果表明，黄芪甲苷进样量线性范围为2.014～10.070μg。
2.2.5精密度试验
取同一份供试品溶液，按上述色谱条件重复测定5次，计算精密度，结果黄芪甲苷峰面积的RSD为0.23％(n=5)。
2.2.6重复性试验
取同一批号样品，配制3种浓度，照含量测定项下方法每个浓度测定3次，结果RSD为1.07％、1.58％、1.91％，表明重现性较好。
2.2.7稳定性试验
取同一份供试品溶液，在0，4，16，24，48h分别进样5次，依法分别测定黄芪甲苷蜂面积值。结果RSD<2.0％，表明本品在48h内测定结果稳定。
2.2.8加样回收率试验
精密称取已知含量的同一批样品，各精密加入黄芪甲苷对照品适量，按2.2.3项下方法制备供试液，依法测定并计算加样回收率，得平均回收率为98.21％，RSD＝1.41％。
2.3水煎煮组最佳工艺确定
正交试验结果见表2，方差分析结果见表3。按下列公式计算综合评分值:出膏率加权评分(y1)＝(出膏率-12)/（25-12）×100；黄芪甲苷含量加权评分(y2)=(测定量-0.2)/（0.4-0.2）×100。综合评分=（yl+y2）/2。表2水煎煮组正交试验结果（略）表3水提工艺方差分析表（略）中国
由表2可见，3个因素的级差大小顺序为A>C>B，提取次数对提取工艺的影响最大，加水量影响较大，提取时间影响最小。由表4可见，因素A(提取次数)、因素C(加水量)有显著性，因素B(提取时间)无显著性。故最佳工艺为A3B1C3，即用10倍量水，提取3次，每次1.5h。按优选的最佳工艺提取3批样品进行验证实验，可知，三批样品出膏率分别为24.14％、24.09％、23.97％；黄芪甲苷含量分别为0.397、0.384、0.391mg/g。验证结果表明工艺基本稳定可行。
2.4醇提组正交试验设计
根据文献和预实验结果［4］，采用正交试验法。以浸膏得率和大黄酸的含量为考察指标，对乙醇浓度(A)、醇用量(B)、提取时间(C)3个试验因素，每个因素3个水平进行优选，并以浸膏得率和大黄酸含量作为考察指标进行试验。因素水平见表4。表4醇提组的因素水平表（略）
2.5大黄酸含量测定
2.5.1色谱条件
填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，色谱柱为SHIMADZUC18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm），流动相为甲醇-0.1％磷酸溶液(85∶15)，检测波长为254nm，流速为1.0ml/min。理论塔板数按大黄酸峰计算应不低于3000。
2.5.2对照品溶液的制备
精密称取干燥2h后的大黄酸对照品0.038g，置于25ml量瓶中，加甲醇至刻度，得含大黄酸0.152mg/ml的对照品溶液，备用。
2.5.3线性关系考察
分别精密量取大黄酸对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，置于10ml量瓶中，加甲醇至刻度，分别进样5μl。以进样量(X)为横坐标，峰面积积分值(Y)为纵坐标，进行线性回归，得回归方程：Y=7867.756X+1.6727(r=0.9998)。结果表明，大黄酸进样量在0.076～0.380μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系。
2.5.4供试品溶液的制备
用L9(34)正交表安排试验，称取处方量的药材，按设定方案进行回流，收集回流提取液，定容至200ml，精密量取50ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，于105℃干燥3h，置干燥器中冷却0.5h，迅速称量。精密量取已定容样品液50ml，水浴蒸干，加5mol/L。硫酸溶液20mL，置水浴加热1h，立即冷却，加氯仿提取3次(30、30、20ml)，合并氯仿液，加水洗涤2次(20、20ml)，弃去水层，氯仿液水浴蒸干，残留物加甲醇定容至5ml，即得。
2.5.5含量测定
分别精密吸取对照品溶液5μl、供试品溶液10μl，分别注入液相色谱仪，按“2.5.1”项下色谱条件测定。高效液相色谱见图1。
2.5.6精密度试验
精密量取“2.5.2”项下大黄酸对照品溶液5μl，重复进样6次测定峰面积。结果，峰面积RSD=1.3％，表明仪器精密度良好。
2.5.7稳定性试验
取“2.5.4”项下的供试品溶液。分别于0，4，16，24，48h时按“2.5.1”项下色谱条件进样测定5次。结果：峰面积RSD=1.18％。表明供试品溶液在48h内稳定性较好。
2.6醇提组最佳工艺确定
正交试验结果见表5，方差分析结果见表6。按下列公式计算评分值：出膏率加权评分(y1)＝(出膏率-13)/（20.5-13）×100；黄芪甲苷含量加权评分(y2)=(测定量-5)/（9.4-5）×100。综合评分=（yl+y2）/2。表5醇提组的正交试验结果（略）表6方差分析结果（略）
由表5可见，3个因素的级差大小顺序为C>A>B，提取时间对提取工艺的影响最大，醇浓度影响较大，醇用量影响最小，实验结果最佳工艺为A2B2C3。由表6可见，提取时间有显著性，醇浓度、醇用量无显著性。考虑生产成本，确定A1B1C3为最佳工艺，即用6倍量60％醇溶液，提取2次，分别为2.0、1.5h。按优选的最佳工艺提取3批样品进行验证实验，可知，三批样品出膏率分别为20.24％、20.32％、19.97％；大黄酸含量分别为9.41、9.37、9.31mg/g。验证结果表明工艺基本稳定可行。
3讨论
验方中大黄取其解毒泄下之功，以清体内热毒，使湿热由下而去；取其活血祛瘀之功，使血行通畅，瘀血得解；一药两用，为君药。而其中大黄酸具有抗菌抗炎作用，故醇提组选择以大黄酸作为含量测定指标。黄芪取其补气之功而治前列腺增生日久气虚之候，而其利水之功又可助它药以泄湿，故水提组以黄芪甲苷作为指标成分。黄芪等药味中的活性成分在水中有较好的溶解度，故考虑用传统的水煎煮提取。大黄、牛膝等醇提组药物中有效成分在醇溶液中溶解度较大。
前列宁颗粒为复方制剂，成分复杂。试验选择以浸膏得率和相应的含量测定为指标，可综合评价工艺的合理性。采用正交设计的试验方法对提取工艺进行优化筛选，确定的提取工艺简便、科学，符合生产要求。
【参考文献】
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所有中药材由安徽省亳州市药材总公司提供，均符合《中国药典》2005版及相关地方标准；黄芩苷和丹酚酸B对照品由中国生物制品检定所提供，批号分别为110715－200212和111562－200302，供含量测定用。
甲醇、乙腈为色谱纯，其它试剂均为分析纯。
2方法与结果
2．1醇提工艺条件的优化以药材黄芩中有效成分黄芩苷的提取转移率和提取液的出膏率作为测定指标，采用正交实验的方法对乙醇提取工艺进行了优选。
2．1．1醇提液中黄芩苷的测定方法色谱条件：色谱柱为DiomandTM（200mm×4．6mm，5μm）；流动相为甲醇－水－磷酸（47∶53∶0．1）；紫外检测波长280nm；柱温为室温；流速1ml／min；进样量：10ml［1］。在上述色谱条件下供试品溶液中黄芩苷能与其它组分达到基线分离。
2．1．2因素水平表的设计与正交实验取影响该提取过程的4个主要因素：乙醇浓度、溶媒量（加水倍量）、提取次数、提取时间，按L9（34）正交实验表进行实验，每个因素设计3个水平。因素水平表见表1。结果见表2。
表1醇提工艺的因素水平（略）
表2黄芩等醇提工艺正交实验及结果（略）
*综合评分为出膏率＋提取率
结果分析：各因素水平之间的极差大小依次为A＞D＞B＞C，表明乙醇浓度对实验结果影响最大，其次是煎煮次数、溶剂用量，提取时间对实验结果的影响最小，最佳条件为A1B3C2D3。但B3与B2相差极小，而若选择B2可较B3节约资源，并减小需浓缩的药液体积，大大节约能源，降低成本，故选择A1B2C2D3作为提取过程的工艺参数。经3批验证实验，黄芩苷的提取率平均为95．51％，出膏率的平均为17．01％，表明该工艺基本合理可行。
2．2水提醇沉工艺的优化以药材丹参中有效成分丹酚酸B的提取转移率和提取液的出膏率作为评价指标，采用正交实验的方法对水煎煮的提取工艺进行优化。
2．2．1水提液中丹酚酸B的测定方法色谱条件：色谱柱为DiomandTM（200mm×4．6mm，5μm）；流动相为甲醇－乙腈－水－甲酸（30：10∶58∶2）；紫外检测波长286nm；柱温为室温；流速1ml／min；进样量10μl。在上述色谱条件下供试品溶液中丹酚酸B能与其它组分达到基线分离。
2．2．2水提过程因素水平的选择及统计结果取影响水提取工艺的3个主要因素：水的用量、提取次数、提取时间，按L9（34）正交实验表进行实验，每个因素设计3个水平。因素水平见表3，结果见表4，方差分析见表5。
表3丹参等水提工艺因素水平（略）
表4丹参等L9（34）水提工艺正交实验及结果（略）
*综合评分为出膏率＋提取率
表5丹参等水提工艺实验结果的方差分析（略）
结果分析：由表4数据可以看出，各因素对实验影响的大小依次为C＞B＞A，即煎煮次数影响最大，其次为煎煮时间，最小为加水量。由表5可以看出，影响因素A和B影响不显著，C因素影响较显著，最佳实验条件为A3B2C3，但A3与A2相差较小，而若选择A2可较A3少节约水资源，并减小需浓缩的药液体积，大大节约能源，降低成本，节省时间，故应选择A2B2C3，即正交表实验，丹酚酸B的提取率平均为91．36％，出膏率平均为20．37％，表明该工艺基本合理可行。
2．2．3醇沉工艺因素水平表的设计取影响该过程的3个主要因素：浸膏相对密度、醇沉液的乙醇浓度、醇沉时间，按L9（34）正交实验表进行实验，每个因素设计3个水平。因素水平表见表6，结果见表7～8。
表6丹参等醇沉工艺因素水平（略）
表7丹参等醇沉工艺正交实验及结果（略）
丹酚酸B转移率=醇沉后丹酚酸B含量醇沉前丹酚酸B的含量×100%
杂质去除率（%）=醇沉前的固体量-醇沉后的固体量醇沉前的固体量×100%
综合评分（%）＝丹酚酸B的转移率＋杂质去除率
表8丹参等醇沉工艺实验结果的方差分析（略）
结果分析：各因素对实验影响的大小依次为C>A>B，即醇沉时间影响最大，其次为浸膏密度，最小为乙醇浓度，最佳实验条件为A3B2C1，但B1与B2相差极小，而若选择B1可较B2则乙醇的用量减少，并减小需浓缩的药液体积,大大节约能源，降低成本，节省时间，而且由方差分析结果可知，3个因素均影响不显著，故应选择A3B1C1，即：醇沉前的浸膏相对密度为1.20，醇沉后乙醇浓度为60%，醇沉时间为12h。经3批验证实验，丹酚酸B的转移率平均为91.60%，杂质去除率的平均为41.42%，表明该工艺参数基本合理可行。
3讨论
本品为中药复方制剂，药味多，成分复杂。根据各药材的理化性质，将22种药材分成3部分，分别采用醇提、水提醇沉的提取方法。
通过正交优化实验，以有效成分转移率和出膏率为评价指标，确定了最佳工艺参数。经过3批验证实验，结果合理可行，且可控性强。
1.2试药
麻黄、芍药、细辛、干姜、甘草、桂枝、半夏和五味子药材（均购于成都市荷花池中药材市场）；磷酸二氢钾、磷酸；甲醇和乙腈为色谱纯。
2方法［2，3］
2.1指标及含量测定方法《中国药典》2005版收载的小青龙汤现有制剂均只以方中的芍药苷为质量控制指标，因此本方保留该质量控制指标。复方中麻黄为君药，因此增加盐酸麻黄碱为质量控制指标。
2.1.1盐酸麻黄碱含量测定方法盐酸麻黄碱对照品溶液的制备：精密称取盐酸麻黄碱对照品10.83mg于100ml容量瓶中，以甲醇定容，摇匀，精密吸取2ml于25ml量瓶中，甲醇定容，摇匀，过0.45μm微孔滤膜，取续滤液备用。
麻黄供试品的制备：精密量取复方提取液适量（相当于麻黄生药0.2g）于已干燥的锥形瓶中，低温挥干，以25ml甲醇溶解，称定重量，超声处理45min，放冷，再称定重量，以甲醇补足减少量，摇匀，滤过，精密量取续液1ml，置中性氧化铝柱（100～200目，内径1cm，1.5g）上，以50%甲醇洗脱，收集洗脱液约9ml于量瓶中，加磷酸1滴，以50%甲醇定容摇匀，过0.45μm微孔滤膜，取续滤液备用。
测定方法：C18柱（250mm×4.6mmDiamonsil5μm），流动相为乙腈-0.1%磷酸（9∶90），以三乙胺调节pH=4.5，检测波长207nm，流速1ml/min，柱温25℃，理论板数以盐酸麻黄碱峰计，不得低于3000。
盐酸麻黄碱标准曲线的绘制：分别吸取盐酸麻黄碱对照品溶液2，4，6，8，10，12，16，20，24μl进样，按照测定方法测定，绘制标准曲线。结果见图1。回归曲线Y=1722.7X+39.103，R2=0.9998，盐酸麻黄碱进样量在0.017288～0.207456μg间具有良好的线性关系。
2.1.2芍药苷含量测定方法
芍药苷对照品溶液的制备：精密称取芍药苷对照品适量，加入量瓶中，甲醇定容，制成60μg/ml的甲醇对照品溶液，过0.45μm微孔滤膜，取续滤液备用。
白芍供试品溶液的制备：精密量取复方提取液适量（相当于白芍生药0.1g），水浴挥干，以35ml稀乙醇转移至50ml量瓶中，超声处理30min，冷却至室温，稀乙醇定容，摇匀，过0.45μm微孔滤膜，取续滤液备用。
测定方法：C18柱（250mm×4.6mm,Diamonsil5μm），流动相为乙腈-0.1%磷酸（14∶86），检测波长230nm，流速1ml/min，柱温25℃，理论板数以芍药苷峰计，不得低于2000。
芍药苷标准曲线的绘制：分别吸取芍药苷对照品溶液1，2，3，4，6，8μl进样，按照测定方法测定，绘制标准曲线，（见图2）。回归曲线Y=15414X+2.5391，R2=0.9998，芍药苷进样量在0.006～0.048μg间具有良好的线性关系。
2.26种提取工艺的优化研究及结果
2.2.1不同提取溶剂回流提取工艺研究及结果以水、60%乙醇、95%乙醇为提取溶剂，按L9（34）正交表进行实验。因素水平安排按照表1执行，实验按各正交表实施，结果用SPSS11.5作方差分析，确定优化工艺。结果见表2～7。表1不同溶液回流提取工艺因素水平（略）表2以水为溶剂回流提取考察结果（略）表3以水为溶剂回流提取方差分析结果（略）表4以60%乙醇为溶剂回流提取考察结果（略）表5以60%乙醇溶剂回流提取方差分析结果（略）表6以95%乙醇为溶剂回流提取考察结果（略）表7以95%乙醇为溶剂回流提取方差分析结果（略）
由方差分析结果分析得，影响因素大小为：提取次数（C）＞提取溶剂量（A）＞提取时间（B），3个因素均具有显著性影响，优化工艺为A2B2C3。
由方差分析结果得，影响因素大小为：提取时间（B）＞提取溶剂量（A）＞提取次数（C），3个因素均具有显著性影响，优化工艺为A3B2C2。
由方差分析结果分析得，影响因素大小为：提取次数（C）＞提取溶剂量（A）＞提取时间（B），3个因素均具有显著性影响，优化工艺为A3B2C3。
2.2.2不同提取溶剂渗漉提取工艺研究及结果以水、60%乙醇、95%乙醇为提取溶剂，按L9（34）正交表进行实验。因素水平安排按照表8执行，实验按各正交表实施，结果用SPSS11.5作方差分析，确定优化工艺。结果见表9～14。表8不同溶剂渗漉提取工艺因素水平（略）表9以水为溶剂渗漉提取考察结果（略）表10以水为溶剂渗漉提取方差分析结果（略）表11以60%乙醇为溶剂渗漉提取考察结果（略）表12以60%乙醇溶剂渗漉提取方差分析结果（略）表13以95%乙醇为溶剂渗漉提取考察结果（略）表14以95%乙醇为溶剂渗漉提取方差分析结果（略）
由方差分析结果分析得，影响因素大小为：渗漉液量（A）＞渗液速度（C）＞药材粒度（B），A和C因素具有显著性影响，优化工艺为A3B2C3。
由方差分析结果得，影响因素大小为：药材粒度（B）＞渗漉液量（A）＞渗漉速度（C），B因素具有显著性影响，优化工艺为A1B3C1。
由方差分析结果分析得，影响因素大小为：渗漉液量（A）＞药材粒度（B）＞渗漉速度（C），A因素具有显著性影响，优化工艺为A2B2C1。
2.3不同提取工艺及提取溶剂对提取工艺的影响对比研究
2.3.1不同正交实验因素分析结果见表15。表15不同正交实验结果分析（略）
2.3.2不同优化提取工艺的对比研究按照上述各种优化工艺，分别称取复方药材进行提取试验，以提取液中盐酸麻黄碱和芍药苷的含量为指标加权（权重系数依次为0.6和0.4），综合评价提取工艺。对比不同提取工艺的差异。结果见表16。表16不同工艺验证结果(略)
2.3.3相同方法不同溶剂对提取工艺的影响研究结果见表17。表17不同溶剂时间的比较结果（略）
2.3.4相同溶剂不同提取方法间的比较研究结果见表18。表18不同提取方法比较结果（略）
2.3.5综合评价结果实验表明，在考察范围内，小青龙汤提取工艺优劣顺序为60%乙醇回流提取＞水回流提取＞60%乙醇渗漉＞95%乙醇回流提取＞水渗漉；提取方法对比研究结果表明，回流提取方法效果较渗漉提取方法效果好；提取溶剂对比研究表明60%乙醇为提取溶剂较其他两种溶剂效果好。
3讨论
现有小青龙汤成方制剂只选择了芍药苷为含量控制指标，对于复方制剂的多指标多成分而言，显得质量控制过于单一。本研究从处方构成出发，增加君药麻黄的指标成分盐酸麻黄碱为指标，更多的注重全方的系统性。
实验结果均反应回流提取法较渗漉法的提取效果好，其中提取溶剂又以60%乙醇为佳，这与控制指标的选择有一定的关系，但是是否在药效方面有正变的关系，还需要进行药效学研究。
小青龙汤整体提取的不同工艺比较结果得出，优化提取工艺为12倍量60%乙醇回流提取2次，1.5h/次。所得优化提取工艺合理可行，可作为小青龙汤的提取工艺。
【参考文献】
［1］段富津.方剂学［M］.上海：上海科学技术出版社，2002：25.
［2］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2005.
为了使知识库使用者快速定位到业务服务所需具体的知识信息，知识信息统一采集编辑按照不同范围权限向各个服务渠道。必须建立结构化客户化的供电服务知识结构，一是对知识信息做结构化拆分与组合，二是对知识进行客户化的转化和编辑。通过供电服务知识信息分类，知识点内容结构梳理，知识点信息属性定义等多种方式对供电服务知识信息进行拆分和组合。从而达到按搜索条件快速定位到最需要的知识信息，按照各渠道的信息权限向不同服务渠道推送所需的供电服务知识信息。知识的客户化转化和编辑，是在知识结构化拆分和组合的基础上，对已确定的知识结构内容的编辑和处理，将专业的供电服务知识内容转化成客户易接受、易懂的知识信息。知识的结构化梳理，主要是通过规范知识分类和建立结构化知识内容模板。
①多维度知识分类。多维度知识分类是指从业务、服务、客户问题不同角度对供电服务知识进行分类。
②结构化知识模板。结构化知识模板是指对知识内容进行分项拆分组合，形成内容结构清晰的知识点。
1.2组建多级多渠道的知识运营管理架构
目前，知识运营管理涉及国网、省、地市、县以及省市县四级公司的业务衔接部门。在这四级的知识运营结构中，省级设立专门部门承担着省供电服务知识的生产统筹、调度管控、应用分析、质量优化等职责，其他部门则承担着衔接处理职能。在岗位的设定和人员的选拔方面，针对每个岗位制定详细的岗位说明书，明确岗位职责、能力要求及任职资格。在岗位的绩效管理考核方面，定义N项关键绩效指标，并针对各个知识运营岗位进行了分解和明确权重。在绩效管理数据的采集统计分析上，定义的管理报表能够提供有效的支撑。
1.3设计具有自我优化能力的流程机制
在知识运营业务流程规范的设计上，对知识运营进行了知识生产协同和知识应用协同的划分，对供电服务知识运营管理团队和供电服务知识各渠道的使用者提出了要求和指导。在知识生产协同方面，从日常性知识生产管理和非日常性知识质量分析优化管理两个方面对知识运营工作详细的流程环节岗位衔接要求进行了具体的规范。达成了知识运营管理的闭环运行和知识运营机制在质量管理体系内的自我优化。在知识应用协同方面，对省级、营业厅、客户服务现场、其他拓展渠道等6大供电服务渠道的供电服务知识应用对象、应用方式、应用流程与协同要求3个方面进行了规范和定义，提出了明确的应用要求，特别是建立了供电服务经验知识反馈提炼与分享机制。
1.4部署多渠道支撑信息应用管理平台
构建多渠道一体化知识库管理体系需建设多渠道支撑信息应用平台。系统平台需包含应用层、管理层、系统层三个层面，并具备数据统计分析优化功能，从而支持信息多渠道的应用。
2多渠道一体化供电服务知识管理体系建设成果评估
知识管理运营体系建设是否符合实际业务运行环境优化的要求，需要通过实际运营来检验。通过分业务组研讨、修订、定稿的方式形成大家认可的业务运营规范；并通过培训、工作辅导的方式达成了理念方法的传递与学习；最后采用抽样试点，调查引导的方式验证了新的知识运营管理体系的有效性。
2.1体系建设果紧紧围绕知识运营业务范围
知识运营业务范围包括运营团队管理、基础知识结构管理、日常知识业务处理、知识应用、知识质量分析管理、知识库工具平台建设等多项业务内容。通过5项规范要求，从方式方法、职责流程、工具功能等方面为知识运营提供具体的业务指导。
2.2通过试点提升团队能力初步优化知识运营结构
在整体知识管理体系建设过程中，通过有计划的组织方案讨论和知识运营方法培训工作，通过分业务组讨论和方案培训的形式进行了咨询理论方法传递，使知识管理团队的知识运营能力得到了有效的提升。经过对当前知识库应用数据的分析，抽样选取6大知识点按照咨询方案的指导进行了优化，最后通过问卷调查的形式检查知识优化成效。
阿莫斯将机械学中经典的杠杆原理加注于普通的轮椅上――通过操作一根可拆卸的杠杆，使用者可以握住靠近轴心的位置做大角度的推动，控制轮椅高速前进；当进入较糟的路面，他只需要握住杠杆的上部，就可以产生较大的扭力将自己推离不平整的地形。阿莫斯将其称作“全地形自由轮椅”。
为了最大限度地降低成本，这种新型轮椅的零件全部来自于普通的自行车，成本不到200美元，“而且人们可以在任何地方修理它们。”除了方便维修和价格低廉之外，这种新型轮椅的最大好处在于使用者可以让轮椅完全贴合崎岖的路面前行，像身障者的另一双强而有力的脚。
设计成功后，阿莫斯带着他的轮椅和工具箱去全世界测试。2008到2009年，他和团队先后走访了危地马拉、坦桑尼亚、乌干达、越南、印度等17个国家，并不断根据使用者的反馈作调整和改善，最终，新设计比之前轻了20磅，跟常规轮椅一样窄。2010年，第三代全地形自由轮椅终于开始量产。
同年，这把轮椅还获得了美国Spark Awards World Changing组的金奖，评委称“这将是一个改变世界的作品”。“这项计划能成功是因为我们联合了所有参与计划的人。”他团队中的15名核心成员除机械工程外，也有人来自其他的学科方向。从概念到创新，从验证到商用，这条链接将学术界和使用者紧密相连，然后，阿莫斯说，“奇迹发生了。”
珠三角地区既是我国加工贸易的最早起源地，也是我国加工贸易发展最为成熟的地区。外商投资的加工贸易不仅是珠三角经济发展的主要推动力，而且在广东省对外贸易中占主导地位。我国发展加工贸易的主要目的之一，就是希望外资进入能带来先进技术，产生技术外溢，进而带动我国产业的技术进步。珠三角地区加工贸易的技术溢出效应是低还是高，带来的技术溢出效应到底有多大，能在多大程度上推动珠三角地区的产业升级，已成为人们讨论的热点话题。
一、珠三角地区加工贸易技术溢出的特点
珠三角加工贸易的技术溢出具有明显的阶段性特征，大体经历三个阶段：
(一)1978～1990年是加工贸易技术溢出的起步阶段。这一阶段主要采取“三来一补”(来料加工、来件装配、来样加工、补偿贸易)的模式。早在召开前的1978年8月底，东莞市虎门镇就正式成立了中国内地第一家“三来一补”企业，编号为“粤字001”。尽管这家企业的规模不大，设备较落后，产品档次也不高，但在春潮萌动的中国内地却抢吃了第一只“螃蟹”，从此揭开了珠三角直接利用外资的序幕。在改革开放之初，珠三角地区一无资金，二无技术，三无管理经验和国外销售渠道，但珠三角也有自身的优势，劳动力丰富而且便宜，土地资源多而且价格低。不仅如此，改革开放之时正是香港产业升级换代之日，香港商人受厂租、劳动力价格居高不下的困扰，急于把劳动密集型产业迁出香港，转移到生产成本相对较低的地方。珠三角以其独特的地理位置、人文优势以及生产成本优势，成为港商的首选地区。珠三角人则因势利导，以乡镇企业为依托，以“三来一补”为突破口，积极发展加工贸易。
(二)1991～2000年是加工贸易技术溢出的发展阶段。主要表现为高新技术产业逐渐成为珠三角经济发展的第一增长点。计算机及软件、通讯、微电子及基础元器件、新一代视听产品、机电一体化、重点轻工和家电等七大主导产业快速发展，技术密集型和资金密集型行业和产品逐步提高。一大批国际知名跨国公司来珠三角兴建高新技术企业，世界500强IBM、飞利浦、杜邦、惠普、三星、施乐、康柏等跨国公司相继在珠三角设立独资或合资企业，同时带来了先进的技术。在珠三角加工贸易技术溢出的发展阶段，珠三角人从实践中逐步意识到“三来一补”的局限性和科学技术的重要性，但由于历史条件的限制，当时人们主要还是关注提升外资加工贸易的技术水平。采取的措施是在淘汰低档次、技术落后、低附加值、高能耗、高污染的“三来一补”企业的同时，有选择地引进了一大批高科技的加工贸易企业。珠三角在提升外资加工贸易科技含量的过程中，自然也带来了技术的溢出效应。主要体现在：第一，加工贸易产品的技术含量高。产品的技术含量高对珠三角地区的同行有很强的竞争作用和示范作用，本地企业通过学习和模仿产生了大量的技术溢出效应。第二，加工贸易与本地产业有密切的关联程度。这一时期，加工贸易的生产料件已经完全改变了全部依靠进口的格局。第三，加工贸易企业普遍重视管理人员、科技人员的培训。在加工贸易企业中，外商出于劳动力成本及其它因素的考虑，往往选择和招聘当地的优秀人才加以培训和管理，为当地培养了一大批懂技术、会管理、熟悉国内外市场的人才。经过技术培训的技术工人和管理人员一旦由外资加工贸易企业流向其他企业或自创企业时，所学的各种技术也随之外流，从而引起溢出。
(三)2001年至今是加工贸易技术溢出的飞跃阶段。珠三角加工贸易技术溢出第三阶段的最大特点是不少跨国公司的研发中心落户珠三角，并且跨国公司本土化的趋势初见端倪。随着国际产业转移的深化，跨国公司纷纷在珠三角设立研发机构。截至2005年底，杜邦、本田、日立、三星等知名跨国公司在珠三角就已设立了研发机构243家。这些研发中心上接研发源头，下连规模生产企业和市场，为珠三角吸收和承接国外高水平技术，增强科技创新能力提供了良好的研发平台。在珠三角加工贸易技术溢出的飞跃阶段，技术溢出效应有实质性的突破。主要表现在：大规模引进成套设备逐步被引进关键技术、关键设备所替代。越来越多的跨国公司为了能进入珠三角市场，竞相以各种方式向珠三角输出技术，技术引进的结构在不断优化。随着珠三角企业技术引进水平的不断提高，引进的目的逐步从单一生产技术的引进转向以提高产品附加值、增强创新能力的技术引进，引进技术方式多元化。跨国公司向珠三角输出技术，除了有技术许可、技术服务、入股投资等传统方式之外，还有相互交换技术使用权、特许专营等新形式，加工贸易企业的高级管理人员和技术人员本地化。重用本地管理和技术的精英使不少跨国公司在中国市场的业绩明显上升，促使跨国公司向人才本地化转变。
二、珠三角地区加工贸易技术溢出的主要路径
(一)技术模仿的路径。技术可以通过模仿和示范产生溢出效应。珠三角生产规模较大的本地企业，相当一部分是在加工贸易的技术、管理等方面示范效应下，通过学习、模仿和竞争，逐渐发展壮大，甚至超过了竞争对手。美的、科龙、格力就是在西方跨国公司的巨大压力下，跟踪跨国公司的技术，经过模仿和创新，不断提高家电业技术水平的典型代表。
(二)配套生产的路径。发展珠三角配套产业是珠三角外向型经济实现技术外溢的直接渠道。在珠三角地区，加工贸易企业的生产料件已经完全改变了改革开放初期全部依靠进口的格局，产品本地化水平逐步提高。以电子信息产品为例，珠三角已集聚了5万多家电子信息企业，打印机配套率达91％、PC机达80％、激光视盘机达64％，稳压电源达53％、计算机主板及功能板达41％。珠江三角洲已成为世界级的IT业制造基地。不少与外资加工贸易企业合作、为外资厂提供配套加工零配件的本地企业，在加工配套过程中逐步积累了原始资本和掌握了生产技术以及市场营销网络，由“配角”地位逐步转化为市场的“主角”。
(三)人才流动的路径。在通常情况下，加工贸易企业的技术与管理人员当地化比例越高，流动性越强，向内资企业流动越多，技术外溢效果越好。掌握技术的人员的流动可以产生技术溢出效应。这是珠三角取得技术溢出效应的重要形式。珠三角加工贸易企业聘用了当地大量的管理人员、技术人员以及普通的员工，实际上就是间接地向珠三角提供技术转移。在珠江三角洲地区，有不少人在加工贸易企业积累了先进技术、管理经验和市场资源，成为自身创业的重要资本。昨天的“打工仔”，今天成为大大小小的“老板”，在珠三角地区是一种较为普遍的现象。
三、珠三角地区提升加工贸易技术溢出的启示
(一)技术的消化吸收和模仿创新是自主创新和产业升级的核心。珠三角地区的经验表明，技术的消化吸收和模仿创新是后进地区发挥后发优势、实现经济和技术赶超的关键所在。没有对转移技术的消化吸收和在此基础上的模仿创新，该地区的发展和产业升级换代的目标就难以实现。如果加工贸易带来的技术溢出长期停留在低技术、低层次的水平上，只会强化经济发展对外来资本的依赖性，这样虽然可以使某一地区的经济出现暂时的繁荣，但有可能由于生产成本上升，加工贸易企业人走楼空，最终导致经济出现“空心化”的现象。
(二)缩小与发达国家技术差距的根本途径是本土企业的自主研发。跨国公司转移技术的主要目的，是在保持技术垄断的前提下，获得技术创新的利润最大化。以技术垄断为前提，跨国公司进行的技术转移都是成熟性技术。不论处在全球化生产链条的哪个环节，从事加工贸易的东道国企业都不可能获得最先进的技术转移和技术溢出，依靠技术转移和技术溢出也就不可能实现产业技术的赶超。即使位于核心的产业链条，依靠核心技术的转移与溢出也是十分有限的。进入21世纪，珠三角人发现，外资加工贸易企业可以向国内转移一般性的先进技术，但真正核心、领先的技术是绝对不可能转移的。利用加工贸易的技术溢出是一个地区产业技术升级的一种办法，但真正缩小与发达国家的技术差距，最终还得靠本土企业的自主研发。
(三)开展深加工结转是实现技术溢出的有效方式。深加工结转是指加工贸易企业将保税进口料件加工的产品结转至下一家加工贸易企业深加工后复出口的经营活动。据统计，目前珠三角七成加工贸易企业采购配套以深加工结转的方式实现。在全省IT、计算机和家电行业中，80％以上的手机部件、90％以上的计算机零部件和100％的彩电部件都可以在珠三角地区内实现配套。
因此，此实验以超声波协同酶激活剂，选择正交实验分析方法，研究了超声功率、超声温度、超声时间、料液比、酶激活剂Fe2+浓度5个因素对蒜素得率的影响，从而确定超声波协同酶激活剂法提取蒜素的最佳工艺，以期为大蒜的深加工利用提供参考。
1 试验部分
1.1 实验仪器
RE-5285 A型旋转蒸发仪（上海医械仪器厂）；WFZ756PC型分光光度计（上海光谱仪器有限公司）；US3120DH超声波清洗器（ 北京优晟联合科技有限公司）。
1.2 工艺流程
大蒜去皮后用植物组织捣碎机捣碎20 min，称取10 g（精确到0.01g）蒜泥于250 mL三角瓶中，添加酶激活剂Fe2+，调固液比，调pH值至6.0。然后放入超声波清洗器中进行超声处理，离心分离，取其上清液，加入体积分数95%乙醇萃取，用旋转蒸发仪减压蒸馏，得到浓缩大蒜素溶液，最后将提取液定容至100 mL并测定蒜素含量。
1.3 正交试验设计
在采用有机溶剂提取法的基础上，选用5因素4水平的正交试验表（见表1），特针对一些影响其收率的主要因素做了大量的实验，并借此确定其提取的最佳工艺方案。
1.4 品分析
采用分光光度法和定硫法测定大蒜素含量。
2 结果与讨论
2.1 相关因素正交试验及结果表
实验结果见表2。
2.2 极差分析
正交试验结果以大蒜素的提取率为主要考察目标，小学数学教学论文大全从表中计算分析最佳条件为A2B3C1D4E2，即超声波功率36 W，超声温度30 ℃，超声时间10 min，料液比1∶4，酶激活剂的浓度5 mmol/L，在这条件下，应有最高的提取率。
2.3 各反应因素的影响与最佳方案的选择
由表3可知，各处理组合的极差的关系为RD>RE>RC> RB> RA。可以看出5因素中D因素即料液比对大蒜素的提取率影响最大，为主要影响因素。
3 结语
通过L16（54）正交试验的方法对有机溶剂提取法提取大蒜素的工艺进行优化，确定了大蒜素的最佳提取工艺条件为：超声波功率36 W，超声温度30 ℃，超声时间10 min，料液比1∶4，酶激活剂的浓度5 mmol/L，大蒜素的提取率1.56%。试验方差结果表明：料液比、酶激活剂浓度与超声时间是提取的主要影响因素。与常规有机溶剂提取法相比，大蒜素提取率为原来的3倍多。
参考文献
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[2] 陈雄.大蒜油抗菌作用的初步研究[J].中国调味品，2002（10）：14-19.
番茄(LycopersiconesculentumMill)又名西红柿、番柿、洋柿子等，原产于南美西部高原，属喜温性蔬菜。它既可作菜熟食，又可当作水果生吃，味道甜中微酸，望之生津止渴，食之沁人脾胃，是我国人民普遍喜食的蔬菜之一[1-2]。
番茄成分很多，如番茄红素、糖、维生素A、B、C、D以及有机酸和酶等。最近几年番茄红素(Lycopene)引起了人们越来越多的兴趣。番茄红素最早从番茄中提取出来，是一类非常重要的类胡萝卜素，主要存在于番茄、南瓜、西瓜、柿子、桃、芒果、葡萄、草莓、柑桔等果实中。研究发现，番茄红素具有优越的生理活性，可高效猝灭单线态氧、清除自由基、防止脂质过氧化、保护机体免受损伤，其抗氧化性在类胡萝卜素物质中最强。它不仅具有抗癌防癌，预防心脑血管疾病、防止动脉硬化、抗肿瘤等功效，还可增强人体免疫系统以及延缓衰老。
笔者对我国近年出版的研究番茄红素的文献，就其类型、年限分布、刊物分布等方面进行计量分析。目的是通过分析番茄红素的研究文献状况，了解我国番茄红素研究的主要特点和所处现状。
1文献收集
有关番茄红素的文献是在20__年2月在清华同方《中国期刊全文数据库》以“番茄红素”为篇名检索所得。这些文献反映了我国20__年以前番茄红素研究的主要成就和趋势，其内容包括综合论述、基础研究、提取制备研究、药理研究、分析测定、开发应用。
2文献分析
2.1番茄红素研究总文献量的分析
剔除非学术性论文，共收集1975年以来的中文期刊上有关番茄红素的文献284篇，年平均文献量为10.9篇，对其所涉及的学科分别进行了统计。
由表1看出，基础、药理研究及制取工艺研究文献所占比例较为均衡，分别为22.54、18.66、24.30，它们在番茄红素研究中占了主要地位。
基础研究的侧重点在生物学，文献量占基础研究文献量的48.4。对番茄红素的稳定性研究的文献也较多,文献量占基础研究文献量的32.8，为番茄红素的应用打下了良好的基础。
表1番茄红素文献在各学科中的分布
研究方向
各项
数据
基础研究
药理研究
制取工艺
分析测定
产品开发
综
述
总
计
生物学
稳定性
其
他
抗氧化
抗
癌
其
他
植物提取
人工合成
分支学科文献量（篇）
31
21
12
20
13
20
60
9
--
--
--
--
文献量（篇）
64
53
69
26
14
58
284
分支占该科
48.4
32.8
19.8
37.7
24.6
37.7
86.9
13.1
--
--
--
--
各科占总文献
22.54
18.66
24.30
9.15
4.93
20.42
100
在提取制备工艺研究中，侧重于从果实提取，多数研究有关提取效率的影响因素，如温度、溶剂用量、提取时间等。在提取方法上，酶法提取法[3]、超临界二氧化碳萃取法[4-7]、微波辐射萃取法[8]、超声波萃取法[9]等提取工艺是近几年发展起来的，从文献内容看，这几种新提取工艺已运用到番茄红素的提取中，随着技术的不断发展，预计它们将取代传统提取工艺，使提取效率达到更高的水平。人工合成番茄红素的研究文献很少，仅9篇。
2.2番茄红素研究文献的年限分布
表2显示，80年代前共发表番茄红素12篇，占总文献量的4.23，主要研究方向是基础研究；90年代共发表20篇，占总文献量的7.04，主要研究提取制备工艺；进入21世纪后，文献量逐年增加，尤其是近3年，文献量呈直线上升趋势。仅20__-20__年就发表文献252篇，占总文献量的88.73，为80年代的21倍多，内容侧重于药理研究与提取制备的新工艺研究。究其原因，人们对番茄红素的保健功能得到了进一步的论证，尤其是抗癌防癌作用日益被国内外所认识并开始得到广泛研究和开发。
表2番茄红素研究文献的年限分布
1975—1989年
1990—1999年
20__—20__年
文献
数（篇）
占年代段百分比（）
文献
数（篇）
占年代段百分比（）
文献
数（篇）
占年代段百分比（）
基础研究
5
41.67
4
20.0
57
22.62
药理研究
--
--
1
5.0
52
20.63
制取工艺
--
--
5
25.0
62
24.60
分析测定
6
50
1
5.0
19
7.55
产品开发
1
8.33
1
5.0
12
4.76
综述
--
--
8
5.0
50
19.84
总文献量（篇）
12
20
252
占总文献百分比（）
[中图分类号] G64[文献标识码]C [文章编号]1673-7210(2010)02(c)-124-02
Teaching contents and method discussion of pharmaceutical engineering graduation (thesis) design
LIU Xianjin, LI Jiaming,LI Chuanrun
(College of Pharmacy, Anhui College of Traditional Chinese Medicine,Hefei230031,China)
[Abstract] The graduation (thesis) design as an important teaching link of pharmaceutical engineering is the bottleneck in teaching results. Contents and methods of the graduation (thesis) design are discussed respectively in the fields of concept innovation, design innovation and methodology innovation.
[Key words] The teaching link of graduation (thesis) design; Project features; Scientific training methods;Production process;Workshop design
制药工程专业的毕业(论文)设计是其教学计划中最重要的实践性教学环节之一,它的基本要求是培养学生综合运用所学的基础理论、专业知识和专业技能,分析、解决制药过程中的工程、科研、社会实际问题的能力,使学生得到工程设计方法和科研能力的初步训练,还能够培养学生正确思考、处理问题的方法和严谨的学习及工作态度。毕业(论文)设计也是学生即将完成学业的最后一个环节,它既是对所学知识的全面检验、总结和综合应用,又为今后走向社会的实际工作奠定一个良好的开端[2]。笔者将对制药工程专业毕业(论文)设计教学环节的内容和方法从理念创新[1]、设计创新、方法创新三个层面上进行探讨,力求完善制药工程创新人才的培养体系。
1 教学理念上注重创新能力的培养
1.1 在教学理念上
以新的“学生―医药工业发展―医药工业实践” 三个中心代替旧的“老师―书本―课堂” 三个中心。改革教学方式,鼓励以学生为主导的自助式学习方式,培养学生分析问题、解决问题的能力,培养学生们的创新意识。
1.2 培养创新意识是工程能力提高的核心
毕业(论文)设计教学的每个环节都有创造性的思维可发掘。教师指导作用是引导学生突破对实习产品的思维定势,鼓励设计创新。优秀的毕业设计充分体现了学生对知识掌握和运用的熟练程度,并可以使学生的设计思路和创新理念得到很好的展现。优秀的设计方案还能够推广应用。
2 选题注重突出工程特色
经过多年的教学实践,全国制药工程教学领域的工作者在教学各环节都摸索出一些行之有效的经验。然而,根据2009年全国制药工程教学研讨会获悉的信息,也发现存在如下的一些共性问题:即制药工程专业毕业(论文)设计教学环节的工程特色不够突出,生产实习靠短期见习完成;既具有工程教育背景,又具有工程实践经验的教师数量偏少;在毕业(论文)设计教学环节中,学生做工程设计的比例偏少,仅20%左右;多数进行专题实验,依据实验数据,撰写毕业论文等。诸多问题主要归纳为毕业(论文)设计教学环节的质量不高而使得制药工程专业的工程特色不够突出这一严重问题。由此可知,制药工程专业的毕业(论文)设计教学环节是目前严重束缚制药工程专业教学效果的瓶颈。因此笔者认为必须从以下几点对制药工程专业的毕业(论文)设计教学环节进行具体的尝试和改进:
2.1 确定提高学生工程能力主题思想是毕业实习的根本出发点
制药工程专业开设的专业课及专业基础课有化工制图、化工原理、药用高分子材料、药剂学、制药工程、药物分离技术、药物合成反应、化学制药工艺学等等。然而,笔者认为制药工程专业学生通过毕业(论文)设计中的工程设计过程是巩固和获取各专业课及专业基础课知识及相互联系,提高学生工程能力的重要途径。因此,笔者建议在师资力量允许的情况下,制药工程专业的毕业(论文)设计应全部进行工程设计。将课程设计、生产实习和毕业设计紧密结合,以实际应用问题推动设计创新,邀请药厂工程技术人员和设计专家到校任兼职教师,一起指导毕业设计。在毕业(论文)设计教学中培养学生的工程素质,使学生逐步树立工程观点,提高工程能力。
2.2 狠抓工艺和设备两条主线是提高工程能力的科学训练方法
在毕业(论文)设计教学内容中构架新的知识体系,坚持选题科学性、内容系统性、知识前沿性、理论新颖性和原则规范性,构建优化的工艺设计知识结构。选题与过程应理论联系实际,结合工程实例培养、训练学生使用工程理论解决工程问题的能力。工程设计方面的选题主要有:某药物成分的提取、分离、合成工艺设计;某药品剂型的工艺设计;某药品剂型生产设备及厂房设计;某药品生产设备的再验证等。通常,制药工程专业学生从大四下学期开始,本科生集中进入毕业(论文)设计阶段,一般学校都安排16周左右。以具体的产品为载体,按照药品生产过程的工艺流程及单元操作过程,开设综合性、创新性实践,使学生掌握不同药品的生产工艺及工艺控制要点,培养学生实际分析问题和解决问题的能力。
2.3 突破重点、难点和薄弱点是提高学生工程能力的关键
通过各种工程设计的选题,要求学生掌握、串联和突破各专业课的知识重点,通过工程数据的计算、训练来化解工程计算这一知识难点,通过工程中的非工艺设计条件的处理和解决,弥补交叉、边缘知识的薄弱点。注重讨论式和参与式教学方式,注重实践性教学方法。训练和提高制药工程专业学生的工程能力。
2.4培养动手、观察、分析、综述四种能力,促使工程能力的提高落到实处
在工程设计的所有题目中,有关某个药品的生产工艺及车间设计方面的题目所涉及的专业课内容最多,因此,笔者以年产一亿粒胃康灵胶囊的生产工艺及车间初步设计为例重点介绍其设计的基本程序及涉及到的专业课。
2.4.1 胃康灵胶囊是一种中药复方制剂,其生产工艺包括前期的中药预处理和剂型生产两大工艺内容。在生产工艺设计过程中,要进行充分比较,尤其注重前沿工艺技术的应用。最终确定最优工艺路线。专业课涉及到中药学、中药炮制学、药剂学、药物分离技术、制药工艺学等课程内容。
2.4.2 根据确定的生产工艺,选择各工艺所需设备。在此过程中,要求学生重点掌握选型原则,掌握所用药物的物料衡算和所选设备的能量衡算,学会依据选型原则中的计算数据和GMP中的具体规定,择优选择所需设备。画出工艺布置框图、设备布置图。专业课涉及到化工制图、化工原理、制药工程原理及设备、药事法规等课程内容。
2.4.3 根据已选工艺和设备,确定所用车间的整体布局。在此过程中,要求学生重点掌握车间布局的原则,学习管路设计,学习空调系统的选取,学习空调净化系统设计,熟悉药品生产过程中的三废处理,画出车间布置图、车间风管布置图。专业课涉及到化工制图、制药工程原理及设备、药事法规、化工原理、三废处理等课程内容。
通过上述工程设计课题的完成,学生们复习、掌握了专业课的知识,掌握了各专业课在工程设计中的地位及相互间的联系,明确了制药工程专业的学习重点和今后实际工作的重点,将制药工程专业的工程特色落到实处。
3 教学途径、手段多样化,实习、参观与论文同步进行
在进行工程设计的过程中,根据选题,确定基本思路,通过互联网,获取丰富的资料。
3.1 校内论文
50%学生在校内由导师的科研项目组进行以基础和应用基础研究为主的毕业论文工作。在老师的指导下,通过学校的各项实验设备,完成药物合成、提取、分离等工艺过程及各种剂型的工艺和车间设计。融会贯通专业知识,熟练使用计算机、互联网,熟练使用CAD画出生产工艺图、设备布置图、管路布置图、车间布置图。在论文开题报告和答辩环节,要求学生将设计内容做成课件,通过多媒体系统演示并表述设计全过程,通过自己归纳、介绍及评委和听众点评、提问,完善、巩固专业知识。实现毕业(论文)设计教学环节有创新性成果。
3.2 校企结合
还有50%左右学生因已与就业单位签约,本人及就业单位都希望先期进入应聘单位实习工作,就采用校企结合的方式,在就业与实践教学基地(科研院所或制药企业)进行制药过程的研发与应用方面的毕业设计工作,由校内和科研院所或企业组成双师型论文指导教师队伍。这部分学生在老师的指导下,根据就业或实习单位的生产情况,选择有关的工程设计题目,在就业单位一边工作,一边理论结合实际,完成设计。这部分学生普遍积极性高、论文的针对性强,既使得论文数据具体、设备及设施真实,又借助老师的帮助,提前进入工作状态,增强了学生的适应能力和创新能力。
3.3 组织参观
为了强化制药工程专业的工程特色,在毕业(论文)设计教学过程中,当客观条件允许的情况下,还应组织制药工程专业学生参观各种设备一应齐全的全国性制药机械展览会和具有一定特色的药品剂型展览会。使学生们对专业课中学过的制药设备及工程设计中用到的制药设备的工作原理、应用范围及操作方法有一个更深、更全面的了解。以便学生们进入不同制药企业时,适应能力强,专业特色鲜明,角色投入迅速,能较快适应用人单位的要求。
4 结语
笔者按照以上程序和内容指导了若干届制药工程专业学生的工程设计,学生们普遍感到收获很大,各门专业课不同的知识点通过工程设计有机地串联起来。并且通过论文撰写,掌握和总结了大型工程设计的思考方法和程序。增强和提高了制药工程专业毕业生的适应能力和工程素质。
制药工程专业是一个正在发展中的专业,有着美好的发展前途,对发展制药行业具有重要的促进作用,也会对提高人类的健康水平作出贡献。我们所有从事该专业教学的工作者必须认真对待在专业发展过程中毕业(论文)设计教学环节出现的各种问题,我们将努力探索、不断改进。相信只有作好充分准备,制订切实可行的对策,才能确保制药工程专业向着我们预定的目标走上成功之路,越办越好,越来越受到社会的认可。
[参考文献]
[1]张英.中药制药工程原理与设备教学方法探讨[J].教育纵横,2004, 2(7):31.
[2]祝宏,刘永琼,巨修炼,等.制药工程专业毕业设计模式的创新及实践[J].药学教育,2005, 21(5):17-19.
