时间：2022-08-19 23:56:55
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【Abstract】 Objective This study is to investigate the level of matrix metalloproteinase-9(MMP-9)in blood of the patients with cough variant asthma(CVA).Methods To select 30 patients with typical asthma,40 patients with CVA and 20 healthy controls.We detected MMP-9 by enzyme linked immunoabsorbent assay(ELSIA)and detected eosinophil count and lymphocyte count in peripheral blood in the three groups.Results The levels of MMP-9 in plasma of CVA group and typical asthma group were higher than that in healthy group(P0．05);The number of eosinophil in blood of CVA group or typical asthma group was higher than that in healthy group(P0．05);The number of lymphocyte in blood of CVA group was higher than that in typical asthma group and healthy group(P0．05);The relationship between the level of MMP-9 and the eosinophil count or lymphocyte count were both positive correlation.Conclusion CVA is a kind of chronic airway inflammation with eosinophil andlymphocyte,and MMP-9 participates the airway inflammation and airway remodeling in CVA.
典型的支气管哮喘常有喘息、胸闷、咳嗽三大症状，而咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma,CVA)，又称咳嗽型哮喘(cough type asthma)，是指以慢性干咳为主要或唯一临床表现的一种特殊类型哮喘。随着病情发展，约30%在几年内可发展成典型的支气管哮喘[1]。早期诊断CVA患者并加以正确的治疗，可望减少CVA发展成典型的支气管哮喘的几率。基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)是MMPs家族的一员，MMP-9参与典型哮喘的气道重塑及气道炎症国内外已有相关报道，但MMP-9是否也参与CVA这种特殊类型哮喘的发病，目前国内外未见相关报道。本研究拟通过观察CVA患者血清中MMP-9的表达情况及其与外周血中淋巴细胞计数、嗜酸粒细胞计数相关情况，来探讨MMP-9在CVA中的作用，为CVA的早期诊断提供依据。
1 对象及方法
1．1 对象 全部病例均为2005年12月至2007年5月在潍坊医学院附属医院门诊就诊和住院治疗的患者，按就诊顺序将患者分为CVA组和典型哮喘组。CVA组，男19例，女21例，平均(32．1±15．2)岁，病程(10．2±3．6)个月，病例诊断符合标准[2-3]。典型支气管哮喘组，男14例，女16例，平均（38．5±13．9）岁，病程(11．7±5．4)年，病例诊断符合2003年全国支气管哮喘防治指南的诊断标准[4]。以上两组患者均为急性发作期，抽血前1个月均未应用糖皮质激素，无合并心血管疾病、内分泌疾病、免疫风湿病等其他系统疾病，并排除妊娠妇女。健康对照组，男9例，女11例，平均(34．3±11．2)岁，均无过敏性疾病、外伤、肿瘤及其他部位病史。以上三组研究对象均无吸烟史，性别、年龄无显著性差异。
1．2 方法
1．2．1 血清MMP-9测定 留取空腹静脉血3 ml，静置自凝1~2 h后，再用3 000 rmp，离心15 min，分离血清，放入-70℃冰箱保存。使用美国R&D SYSTEMS生产的试剂盒，采用ELISA法测定，具体操作参照药盒说明。
1．2．2 外周血嗜酸粒细胞、淋巴细胞计数 采外周血按常规计数。
1．3 统计学方法 细胞计数、MMP-9数据用（x±s）表示。多组间均数比较采用方差分析；相关性采用直线相关分析。统计学处理采用SPSS11．0统计软件分析。取α=0．05为检验水准。
2 结果
2．1 CVA组与典型支气管哮喘组、健康对照组血清中MMP-9水平比较 从表1可见，CVA组与典型哮喘组其血清中MMP-9水平显著高于健康对照组(P0．05)。
2．2 CVA组与典型支气管哮喘组、健康对照组外周血嗜酸粒细胞、淋巴细胞计数比较 见表2，CVA组Eos和Lym显著高于健康对照组(P0．05)，而Lym则显著高于典型哮喘组(P
2．3 CVA组血清中MMP-9水平与外周血嗜酸细胞计数、淋巴细胞计数相关性分析 由图1、2可见，CVA组MMP-9水平与外周血嗜酸细胞计数(r=0．581,P
3 讨论
支气管哮喘是由许多细胞和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾患，病理生理表现为气流阻塞和气道高反应性。其病理学基础涉及气道炎症和气道结构改变。CVA作为一种特殊类型的支气管哮喘，许多研究表明，其发病机制和病理学改变与典型支气管哮喘相似。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)是一组具有相同功能、结构高度同源、依赖锌离子的内肽酶的总称，其主要作用是降解ECM和基底膜。由于MMPs在介导细胞移行和细胞外基质(extral cellear memberma,ECM)重构方面具有独特的作用，近几年来，人们开始关注基质金属蛋白酶及其抑制剂在哮喘发病过程中所发挥的作用。MMP-9是MMPs家族的一员，其水平在支气管哮喘患者的支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)、痰、血清、血浆中都增加[5]。它不仅能降解气道和肺的ECM和基底膜，而且能调节其它蛋白酶和细胞因子，在支气管哮喘的发生发展中起重要作用。
外周血嗜酸粒细胞、淋巴细胞计数表明：CVA是以嗜酸性粒细胞、淋巴细胞浸润为主的慢性气道炎症，其中淋巴细胞较典型哮喘明显增高，提示哮喘的不同阶段，其气道炎症的启动机制是有差别的，详细机理有待于进一步探讨。
CVA患者血清中MMP-9水平与外周血嗜酸粒细胞、淋巴细胞相关性说明：在CVA发病中嗜酸粒细胞、淋巴细胞可能参与或影响了MMP-9的合成与释放,这与Ohno,Weeks等[6-7]研究结果一致。
本研究分别测定CVA患者和典型支气管哮喘患者急性发作时血清中MMP-9水平，结果显示，CVA患者血清中MMP-9水平和典型支气管哮喘患者一样都显著高于健康对照组(P
参考文献
［1］ Fujimura M,Nishizawa Y,Nishitsuji M,et al.Predictors for typical asthma onset from cough variant asthma.Asthma,2005,42(2)：107-111.
［2］ David J,Lucy M,Osbornk.Cough variant asthma：a review of the clinical literature.Asthma,1991,28：85.
［3］ Corrao WM,Braman SS,Irwin RS,et al.Chronic cough as the sole presenting manifestation of bronchial asthma.N Engl Med,1979,300：633.
［4］ 中华医学会呼吸病学分会哮喘学组.支气管哮喘防治指南(支气管哮喘的定义、诊断、治疗及教育和管理方案).中华结核和呼吸杂志,2003,03：132-138.
［5］ Jeffrey J.Atkinson and Robert M.Senior.Matrix Metalloproteinase-9 in Lung Remodeling.Am.J.Respir.Cell Mol.Biol,2003,28(1),12-24.
【关键词】 肝硬化 ip 10 mrna pcr 外周血 转氨酶
肝硬化是肝脏纤维结缔组织弥漫性增生伴有肝细胞结节状再生, 是肝细胞在多因素作用下反复损伤的慢性病理过程。ifn?γ诱生蛋白10(interferon γ?inducible protein 10, ip?10)是1985年luster等用ifn?γ刺激u937细胞株, 从cdna基因库中筛选出, 属cxc家族elr?亚族, 可由ifn?γ、 lps等诱导产生, 介导th1型炎症反应, 抑制血管新生及肿瘤生长。丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, alt)与天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, ast)及其ast/alt比值能判断肝病进展及肝病预后的较好指标[1]。为了解ip?10与血清转氨酶水平关系及其在肝硬化发病机制中的作用, 筛选39例慢性乙肝后肝硬化患者, 探讨其外周血ip?10及其mrna水平, 现将结果报道如下。
1 材料和方法
1.1 材料 ficoll?hypaque分离液购自上海试剂二厂; hbv?dna诊断试剂购自上海中亚基因研究所; elisa法ip?10试剂盒购自法国dlaclone公司; trizol试剂购自美国invitrogen公司; cdna合成试剂购自上海申能博采生物科技有限公司; 半自动生化仪?ecom?f6124购自德国eppendorf公司; exl808全自动酶标仪和exl?50x全自动洗板机购自美国bio?tek公司; lightcycler faststart dna master sybr greenⅰ购自德国roche公司; icycle荧光实时定量pcr仪购自美国bio?rad公司。
1.2 检测对象 39例肝硬化患者为2006-01/2007-05我校教学医院收治的患者。其中男27例, 女12例, 年龄31.2～62.5岁, 平均44.5岁, alt升高者18例, ast升高者24例, ast/alt>1.0者27例; 入选患者均为hbv感染者, 临床诊断符合2005年全国病毒性肝炎会议修订诊断标准, 病程均超过6个月, 无合并hav、 hcv、 hdv、 hev、 hiv感染的实验室依据, 无其他自身免疫性疾病, 3个月内未系统使用抗病毒和免疫抑制剂治疗。另选25例本市中心血站体检正常献血员为对照组, 其中男16例, 女9例, 年龄20.3～42.9岁, 平均32.0岁。
1.3 方法
1.3.1 标本采集 分批采取患者晨起空腹静脉血5 ml, 分别置2支含肝素的无菌eppendorf管和2支灭菌普通管。肝素抗凝血以ficoll?hypaque常规分离外周血单个核细胞(pbmc), 普通管常规分离血清备检。
1.3.2 血清ip?10检测 采用elisa以试剂盒提供标准品绘制标准曲线, 每批检测设空白、 阴性、 阳性对照各2孔, 取100 μl待测血清和100 μl辣根过氧化物酶（hrp）标记的抗趋化因子单克隆抗体(mab), 加至包被有趋化因子mab的酶标反应板孔内, 37℃孵育1 h, pbs缓冲液洗涤5次, 加100 μl底物3?3甲基苯并噻唑啉?6?磺酸盐, 室温30 min, 加2 mol/l h2so4终止反应, 在exl808全自动酶标分析仪上(450±2) nm处读取a值, 每孔测定2次, 取均值, 依标准曲线确定血清ip?10含量。ip?10最低检测水平<2 ng/l, 且批内和批间变异系数分别为<5%和<7%。
1.3.3 ip?10 mrna检测 采用real?time pcr法。将分离的pbmc以rpmi1640培养液调整细胞数至(1～2)×109个/l悬液; 以trizol试剂抽提pbmc总rna, 并逆转录为cdna, 置-86℃冰箱备检。以sybr greenⅰ荧光标记法检测pcr产物, 总反应体系25 μl, 包括上下游引物各10 pmol, mgcl2 2.5 mmol/l, ex?taq 1.25 u, dntp 2 mmol/l, 1×pcr buffer (500 mmol/l kcl, 100 mmol/l tris, 20 μg/l gelatin, ph8.3), 2×sybrtm greenⅰ液, 2 μl标准品或模板cdna(1∶5稀释)。趋化因子引物设计参照hirata等方法进行[2, 3], ip?10引物序列和扩增片段长度见表1。pcr扩增参数如下: 95℃预变性300 s, 然后95℃ 50 s, 55℃ 40 s, 72℃ 90 s共35个循环, 最后72℃延伸300 s。以甘油醛?3?磷酸脱氢酶(gapdh)为内对照, 以lg cdna/lg gapdh比值代表其mrna水平。
表1 hbv及ip?10引物序列和扩增片段长度（略）
1.3.4 标准品和标准曲线制备 以gapdh为参照标准, 为确定定量扩增的效率和灵敏度, 将起始浓度为(106 copies/μl)的gapdh, 按1∶10设6个梯度浓度, 即106 copies/μl、 105 copies/μl、 104 copies/μl、 103 copies/μl和102 copies/μl、 0。
1.4 统计学处理 ip?10及其mrna水平以x±s表示; 采用spss11.5软件进行t检验及相关分析, p<0.05有统计学意义。
2 结果
2.1 不同转氨酶水平患者ip?10表达 rt?pcr显示肝硬化患者ip?10表达(图1), elisa及real?time pcr显示患者外周血ip?10及其mrna水平升高(p<0.05或p<0.01, 图2), 依alt、 ast水平将患者分为alt、 ast正常组、 升高组, alt、 ast升高组及ast/alt>1.0组外周血ip?10及其mrna水平高于转氨酶正常组, 差异亦有统计学意义(p<0.05或p<0.01, 图2)。
图1 pbmc中ip?10表达（略）
1, 3, 5: gapdh; 2, 4, 6: ip?10; 1, 2: 对照组; 3, 4: 患者1（转氨酶正常）; 5, 6: 患者2（转氨酶升高）.
图2 ip?10及其mrna与转氨酶关系（略）
ap<0.05, bp<0.01 vs 对照组或相应正常组.
2.2 ip?10表达与转氨酶水平关系 alt升高组患者血清ip?10水平与alt相关(r=0.6284, p<0.01, 图3), ast升高组血清ip?10水平与ast明显相关(r=0.7162, p<0.01, 图4), ast/alt比值升高组血清ip?10水平与ast/alt比值亦明显相关(r=0.6970, p<0.01, 图5)。
图3 血清ip?10水平与alt相关性（略）
图4 血清ip?10水平与ast相关性（略）
图5 血清ip?10水平与ast/alt相关性（略）
3 讨论
ip?10为cxc家族elr-趋化因子, 对表达cxcr3受体的t淋巴细胞、 单核细胞等产生趋化游走。本研究结果显示, hbv感染后肝硬化患者外周血ip?10及其mrna水平增高, 与对照组相比, 差异有统计学意义(p<0.01); pbmc内ip?10 mrna与血清ip?10蛋白水平具有一致性, 提示 pbmc内ip?10 mrna可能是导致血清ip?10水平升高的重要原因。chuang等[4]研究显示ip?10在原发性胆汁性肝硬变患者血浆中明显升高, 且和病情的严重程度相关。赵金红等[5]研究表明ip?10在慢性乙肝中表达升高, 介导炎症反应, 参与乙型肝炎慢性化。hbv感染后肝硬化患者体内ip?10表达增高可能的原因为: ①肝硬化患者存在一定程度的免疫功能紊乱, 肝清除能力下降, 内毒素生成增加, il?1和tnf?α生成, tnf?α、 il?1β、 和ifn?γ通过ifn调节因子家族p48和2个stat?1形成命名为ifn激活因子3的三聚体, 与ifn刺激元件(isre)结合后, 从而驱动ip?10 mrna表达[6]。②肝硬化进程中,随着肝细胞的逐渐坏死, 胶原合成及胶原沉积不断增加, 在肝细胞炎性改变的基础上纤维化程度逐渐加重, 血清ip?10水平升高。③肝硬化患者常伴有不同程度的门脉高压、 一定程度胃肠道菌群失调、 肠黏膜缺血缺氧, g-菌及其产物lps等经破损黏膜入血, ip?10分泌增加。④肝硬化患者全身高动力循环状态, 门脉高压, ip?10可维持血管稳态, 可能作为免疫抑制剂, 发挥潜在的抗肿瘤作用。
本实验结果显示, 肝硬化患者血清ip?10含量与alt水平呈正相关, 表明ip?10水平在一定程度上反应肝硬化的炎症活动状况, 对了解肝硬化的进展有重要意义。hbv感染的肝细胞损伤主要来自宿主的免疫应答[7], 机体内免疫复合物增加, 刺激机体产生大量tnf?α、 il?6等前炎症因子, 这些因子本身可诱使肝脏微循环障碍, 血液通透性增加, 全身高动力循环, 肝细胞水肿变性, 继而坏死, alt大量释放入血, ip?10表达增强。王健等[8, 9]研究发现在慢性乙肝及丙型肝炎中ip?10表达水平升高且和alt表达水平呈正相关, 参与肝炎的慢性化进程。同时血清内ip?10含量与ast水平呈正相关。一般情况下, ast升高幅度不及alt, 随着hbv的感染持续, 肝硬化程度加重, 机体内毒素水平升高, 可直接杀伤正常和hbv感染肝细胞, 引起肝细胞黄疸, 血清胆红素升高, 形成肝脏炎症损害, 使ip?10活性增加。nishioji等[10]研究表明慢性乙肝中血清ip?10水平较正常对照组明显升高, 且和血清转氨酶水平成正相关。ast/alt是反映肝细胞损伤严重程度和评估预后发展的重要指标。本研究结果提示ast/alt>1.0组血清ip?10水平明显高于ast/alt≤1.0组。生理情况下ast/alt比值约1.15, 肝细胞受损初期比值先下降, 随着细胞受损加重, 比值呈上升趋势, 肝硬化患者线粒体破坏, ast明显升高, ast/alt>1.0甚至>2.0。ip?10对th1型细胞等有较强的趋化作用, 使其聚集到炎症部位, 在清除病毒的同时产生溶酶体酶、 氧自由基等炎性介质加重肝细胞损伤。
综上所述, 在hbv感染后肝硬化患者外周血ip?10及其mrna表达水平升高, 与肝细胞损伤程度密切相关, 在清除病毒的同时加重炎症反应, 在肝炎后肝硬化发病机制中起重要作用。
【参考文献】
肝硬化是肝脏纤维结缔组织弥漫性增生伴有肝细胞结节状再生, 是肝细胞在多因素作用下反复损伤的慢性病理过程。ifn?γ诱生蛋白10(interferon γ?inducible protein 10, ip?10)是1985年luster等用ifn?γ刺激u937细胞株, 从cdna基因库中筛选出, 属cxc家族elr?亚族, 可由ifn?γ、 lps等诱导产生, 介导th1型炎症反应, 抑制血管新生及肿瘤生长。丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, alt)与天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, ast)及其ast/alt比值能判断肝病进展及肝病预后的较好指标[1]。为了解ip?10与血清转氨酶水平关系及其在肝硬化发病机制中的作用, 筛选39例慢性乙肝后肝硬化患者, 探讨其外周血ip?10及其mrna水平, 现将结果报道如下。
1 材料和方法
1.1 材料 ficoll?hypaque分离液购自上海试剂二厂; hbv?dna诊断试剂购自上海中亚基因研究所; elisa法ip?10试剂盒购自法国dlaclone公司; trizol试剂购自美国invitrogen公司; cdna合成试剂购自上海申能博采生物科技有限公司; 半自动生化仪?ecom?f6124购自德国eppendorf公司; exl808全自动酶标仪和exl?50x全自动洗板机购自美国bio?tek公司; lightcycler faststart dna master sybr greenⅰ购自德国roche公司; icycle荧光实时定量pcr仪购自美国bio?rad公司。
1.2 检测对象 39例肝硬化患者为2006-01/2007-05我校教学医院收治的患者。其中男27例, 女12例, 年龄31.2～62.5岁, 平均44.5岁, alt升高者18例, ast升高者24例, ast/alt>1.0者27例; 入选患者均为hbv感染者, 临床诊断符合2005年全国病毒性肝炎会议修订诊断标准, 病程均超过6个月, 无合并hav、 hcv、 hdv、 hev、 hiv感染的实验室依据, 无其他自身免疫性疾病, 3个月内未系统使用抗病毒和免疫抑制剂治疗。另选25例本市中心血站体检正常献血员为对照组, 其中男16例, 女9例, 年龄20.3～42.9岁, 平均32.0岁。
1.3 方法
1.3.1 标本采集 分批采取患者晨起空腹静脉血5 ml, 分别置2支含肝素的无菌eppendorf管和2支灭菌普通管。肝素抗凝血以ficoll?hypaque常规分离外周血单个核细胞(pbmc), 普通管常规分离血清备检。
1.3.2 血清ip?10检测 采用elisa以试剂盒提供标准品绘制标准曲线, 每批检测设空白、 阴性、 阳性对照各2孔, 取100 μl待测血清和100 μl辣根过氧化物酶（hrp）标记的抗趋化因子单克隆抗体(mab), 加至包被有趋化因子mab的酶标反应板孔内, 37℃孵育1 h, pbs缓冲液洗涤5次, 加100 μl底物3?3甲基苯并噻唑啉?6?磺酸盐, 室温30 min, 加2 mol/l h2so4终止反应, 在exl808全自动酶标分析仪上(450±2) nm处读取a值, 每孔测定2次, 取均值, 依标准曲线确定血清ip?10含量。ip?10最低检测水平<2 ng/l, 且批内和批间变异系数分别为<5%和<7%。
1.3.3 ip?10 mrna检测 采用real?time pcr法。将分离的pbmc以rpmi1640培养液调整细胞数至(1～2)×109个/l悬液; 以trizol试剂抽提pbmc总rna, 并逆转录为cdna, 置-86℃冰箱备检。以sybr greenⅰ荧光标记法检测pcr产物, 总反应体系25 μl, 包括上下游引物各10 pmol, mgcl2 2.5 mmol/l, ex?taq 1.25 u, dntp 2 mmol/l, 1×pcr buffer (500 mmol/l kcl, 100 mmol/l tris, 20 μg/l gelatin, ph8.3), 2×sybrtm greenⅰ液, 2 μl标准品或模板cdna(1∶5稀释)。趋化因子引物设计参照hirata等方法进行[2, 3], ip?10引物序列和扩增片段长度见表1。pcr扩增参数如下: 95℃预变性300 s, 然后95℃ 50 s, 55℃ 40 s, 72℃ 90 s共35个循环, 最后72℃延伸300 s。以甘油醛?3?磷酸脱氢酶(gapdh)为内对照, 以lg cdna/lg gapdh比值代表其mrna水平。
表1 hbv及ip?10引物序列和扩增片段长度（略）
1.3.4 标准品和标准曲线制备 以gapdh为参照标准, 为确定定量扩增的效率和灵敏度, 将起始浓度为(106 copies/μl)的gapdh, 按1∶10设6个梯度浓度, 即106 copies/μl、 105 copies/μl、 104 copies/μl、 103 copies/μl和102 copies/μl、 0。
1.4 统计学处理 ip?10及其mrna水平以x±s表示; 采用spss11.5软件进行t检验及相关分析, p<0.05有统计学意义。
2 结果
2.1 不同转氨酶水平患者ip?10表达 rt?pcr显示肝硬化患者ip?10表达(图1), elisa及real?time pcr显示患者外周血ip?10及其mrna水平升高(p<0.05或p<0.01, 图2), 依alt、 ast水平将患者分为alt、 ast正常组、 升高组, alt、 ast升高组及ast/alt>1.0组外周血ip?10及其mrna水平高于转氨酶正常组, 差异亦有统计学意义(p<0.05或p<0.01, 图2)。
图1 pbmc中ip?10表达（略）
1, 3, 5: gapdh; 2, 4, 6: ip?10; 1, 2: 对照组; 3, 4: 患者1（转氨酶正常）; 5, 6: 患者2（转氨酶升高）.
图2 ip?10及其mrna与转氨酶关系（略）
ap<0.05, bp<0.01 vs 对照组或相应正常组.
2.2 ip?10表达与转氨酶水平关系 alt升高组患者血清ip?10水平与alt相关(r=0.6284, p<0.01, 图3), ast升高组血清ip?10水平与ast明显相关(r=0.7162, p<0.01, 图4), ast/alt比值升高组血清ip?10水平与ast/alt比值亦明显相关(r=0.6970, p<0.01, 图5)。
图3 血清ip?10水平与alt相关性（略）
图4 血清ip?10水平与ast相关性（略）
图5 血清ip?10水平与ast/alt相关性（略）
3 讨论
[起跑准备]
制订计划要趁早
问题：什么时候订计划、怎样订计划最好
在初三学习中，学习目标和计划起着举足轻重的作用，如果没有尽早明确学习计划，学习劲头、效果就会打折扣，成绩也难以提高。初三生要对自己有客观认识，尽早制订好适合自己的每周学习计划。计划既不要过简，也不必过繁，要有的放矢，可操作性强。学生的学习计划以“周”为单位制订最有效，这样不会因为计划时间过长让自己厌烦，也容易调整自己的学习状态。一星期只做6天计划，把星期天空出来，劳逸结合。初一、初二学习的知识和初三新学期所学的知识是相互关联的。在学习新知识的同时，学生还要注意复习以前遗漏的、没掌握的知识点。
[学法导航]
以“渔”获“鱼”七步法
问题：制订目标后怎样来一步步实现
对策：学业、生活、心理七步法
1、合理利用和安排时间
“凡事预则立，不预则废。”刚上初三，最好能订一个学习计划，长远计划和近期计划相结合，最好能细致些，具体到早、午、晚做什么、学什么、复习什么。
2、平衡各科，注意基础
妥善处理好优势科目和劣势科目的关系，尽量保持平衡。专家认为，对刚升上初三的学生来说，各科一般是一边上新课一边复习学过的内容，这个时候，相对来讲，供学生自由支配的时间多一些，我们可指导学生在自己较差的科目上稍微多花一点精力。而化学这门新学的科目，从一开始就要认真打好基础，即使不一定成为优科，也不至于成为弱科。
到了中考前三个月，情况就有所不同了。可能经过几个月的努力，原来相对较弱的科目已经有了明显的进步，也可能收效仍不是十分显着。但这时如果再偏向弱科的话，很可能把比较强的科目也拉了下来。因此，应该在尽量照顾弱势科目的前提下，全面兼顾各科，并且努力提高优势科目，以期在优势科目的考试中与别人拉开差距，弥补弱势科目的不足。
3、搞好生活，保证学习
从某种意义来说，高考[微博]、中考不仅是智力的竞争，也是体力的竞争，“开夜车”或不午睡，牺牲休息时间去突击学习会搞垮身体，不值得，实际上也不利于学习。总之，生活越有规律，学习成效就越大，成绩上升就越快。
4、加强思维能力培养
多思多问课堂上，老师讲解的内容相当丰富，并具有很强的逻辑性，他们所讲的很多东西往往是多年教学实践的经验所得，是课本上根本找不到的，对培养我们的分析、判断和推理能力具有很大的帮助。所以，课堂上学生一定要紧跟老师的思路，集中注意力听取他们一些独特的见解，掌握他们的思维方式及其认知规律，并认真做好笔记。课外，更要多向任课教师请教，以加深理解，拓展知识面。
培养思维能力的另一途径，就是经常运用逻辑思维进行独立思考，使自己的思维能力不断得到锻炼和提高。
5、仔细分析错误，避免重犯
对于做练习或各种测验中出现的一些错误，不能只简单更正一下就完事，而要认真地加以分析，找出造成错误的症结所在。这些症结正暴露了我们掌握得不够牢固的某些薄弱环节，因而要及时地查漏补缺。可建议学生设一个错题本，通过分析错题，明白自己的弱点，经常拿错题本翻翻，可进一步巩固基础知识，以避免下一次重犯错误。
6、善于归纳和总结
归纳和总结，这是使知识条理化、网络化和立体化的关键一环。
可从两方面进行总结：
(一)内容上，分科、按体系、分章节。
(二)时间上，每节课后、每次作业后、每轮测验后、每日、每周、每月，都应及时梳理、巩固知识点。
7、满怀信心，提高素质
保持一颗平常心，放松自己的心灵，不要被分数牵着鼻子走，在竞争压力面前不屈服，在挫折面前不灰心丧气，学习上尽力而为，即可问心无愧。
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第二，缺点：1、自己的自制力不强。2、外在因素的诱惑使自己不能投入学习中。3、不够坚持，缺乏恒心。
我觉得这应该会是一个可实施的学习计划，因为优点还是大于缺点的，且缺点可以克服。
2、确定目标
每天都要做到看课外书（课余时间）；每周老师布置的作业按时完成（周末）；对于要考试的科目要看书复习（晚自习时间）；写英语四级试卷（每周2套抽早自习或下午）；每天早上记二十个单词。一周要去两三次图书馆；上课要认真听课并做好记录、积极回答问题；早上努力学习英语。
3、确定前提条件
不可控制的：上课听课可能会走神，导致记录不全面；可能会抑制不住上网的情况；周末可能朋友会找自己逛街而不能推脱，导致周末不能实施计划。
部分可控制的：比如每天课余时间的看书能不能坚持；一周去图书馆的次数；除开学习娱乐时间。
可控制的：早上起床早自习与晚上的晚自习；按时完成老师布置的作业的时间；写英语试卷。
这是预期环境，即假设条件。
4、拟定可供选择的可行方案
对于一周的学习计划，我觉得我能够选择的方案一个。所以，只拟定的可选择的方案一个。
首先，我想说说它的优点：第一，分配比较合理，不具夸张性。第二，简单明了。第三，如果有一定的实施性，且实施了效果会很好。
缺点：第一，与预定的目标有一定差距。第二，有些可能不能实现，特别是周末的方案。第三，对于课余时间休息太少（可能有时候会想要上网）。
5、评价可供选择的方案
1. 这个方案中存在一定的隐患，但是是可以避免的，所以个人觉得问题不大。
2. 个人觉得实施此方案会给丰富自己的业余生活；以及会改善自己经常上网的状态；还可以是学习能力提升；改善慵懒也是很重要的一方面。
3. 对于每天要完成的学习量，我觉得还是较为合理的，也是可行的。
4. 当然这一计划不仅会带来学习上的进步，取得一定的效果，也会使自己的业余生活不那么舒坦，使自己和朋友的沟通变少，生活中少了一份除了 学习以外的乐趣。更重要的是如果没有实施好就会使自己的时间浪费。
6、选择方案
我所选定的方案就就一个。所以对于其它方案就没有制定。只要从它的患处改一下就会成为可实施的方案。
7、制定派生计划
制定一周的学习计划，需要时间计划(合理安排时间)；活动计划（活动的开展的计划制定）作为其支撑。这些的合理配置与利用可以大大地提高一周学习效率，是效果清晰明了。
8、编制预算
随着素质教育和终身教育理念的兴起，自主学习理念慢慢融入到大学英语教学中。笔者在教学中发现，学生普遍掌握了一些认知学习策略，但对自主学习要求较高的学习策略，了解并不多，并且在学习过程中，不知道该如何选择适合自己的学习策略。因此，在学习策略的培养方面，教师需要对学生进行一些培训和指导。
奥马利和查莫特（O’Mally&Chamot，1990）根据认知心理学把学习策略分为认知策略（Cognitive Strategies），元认知策略（Meta-cognitive Strategies）和社会、情感策略（Social Mediation）。认知策略主要包括复述，联想记忆，做笔记，做小结，发现问题，解决问题等策略。元认知策略主要包括制定学习计划，自我记录，自我监控，自我评估等策略。社会、情感策略包括怎样在学习互动活动中放轻松，怎样制定小组规则，怎样与他人合作学习，怎样与人有效的沟通，怎样评估合作小组伙伴等策略。
教师在向学生介绍和培养学生形成自主学习策略之前，要特别注意矫正学生对英语自主学习策略不正确的看法。教师和学生都要形成对自主学习策略的正确认识：第一，学会如何进行英语学习比学会一些具体的英语单词或语法点更重要。第二，在英语自主学习过程中，正确地使用适合自己的学习策略，可以提高学习效率。第三，培养学生的责任感。学习策略的选择和培养不能过分依赖教师，这是学习者自己的责任。第四，对学生英语自主学习策略的培养不是把一些固有的学习策略强加给他们，而是向他们介绍一些经过验证的、有效的学习策略，帮助他们寻找到适合自己的、个性化的、系统的英语自主学习策略。第五，学习不成功者可以向学习成功者借鉴其英语自主学习策略。第六，对于英语自主学习策略，只停留在了解阶段是不行的，必须经过训练和实践，从而形成自己的学习策略体系。第七，英语自主学习策略的训练不是浪费时间，而是为了更好地开展英语学习。
一、制订学习目标和学习计划
在教师的指导和帮助下，要求学生制定出近期的、具体的学习目标和相应的每周学习计划。
近期的、具体的学习目标可以增强学生完成任务的信心，达到近期目标会给学习者带来更多的满足感和更强的自我效能感，增强坚持英语自主学习的信心。通过制订每周学习计划，管理自己的学习进程，学生增强了自主学习能力。要求学生每周写下自己的学习目标并根据学习目标制订具体的自主学习计划（包括听说读写四个方面）。每一天的学习活动都按照学习计划进行。比如：学生可以计划星期一练习VOA听力30分钟，在线阅读Chinadaily英语新闻50分钟；星期二用Skype和英语母语者对话20分钟，阅读700字，并根据阅读内容写出100字读后感。每周利用教师安排的课堂时间和晚自习时间执行计划。每一周开始时，学习计划会由合作小组伙伴和教师检查。学习目标和学习计划的前后对比，系统地反映出学习者英语自主学习内容和程度的变化过程。根据笔者对实际教学过程中学生学习目标和学习计划的整理和分析，学生初期制订的学习目标往往“好高骛远”、空洞而且难以实现。如学生冯源制订的第二周学习计划是“Enhance reading ability， and achieve the level 6 of IELTS”，这个目标远大且实施起来无从下手，容易产生困惑。在教师的帮助和指导下，他将目标重新定为“Read 6 articles from IELTS reading materials sent out by teacher， and understand the new words ”。对于刚刚接触到自主学习理念的学生来说，这个目标不仅清晰，实施起来难度也不大，更有利于学生根据此目标制定自主学习计划，也能使他们因完成目标而产生更大的满足感，激励其进行下一步学习。如此每周一点一滴地推进学习进程，也让学生明白了学习没有捷径，“积跬步才能至千里”。
二、填写学习日志
每周制订出学习目标和学习计划后，要求学生在英语自主学习过程中做好记录，填写学习日志。学习日志要求学生认真详细地记录下每天学习的内容、时间和资源来源。每周自主学习结束后比照自己的学习日志与学习目标、学习计划，看自己是否完成了既定目标，是否按照计划进行学习。如果学习日志所体现出的学习进程和效果与计划不符，就要寻找原因，修改下周的学习目标和计划。逐步使自己的学习目标、学习计划和学习进程一致，对自己的自主学习做到有效管理。学习日志同样反映了学生自主学习的进程和自主程度，通过前后对比也可看出变化。
三、合作学习
美国明尼苏达大学合作学习研究中心约翰兄弟（Johnson & Johnson，1994）的研究表明，合作学习对于学生的学习和发展具有明显的促进作用。成功的自主学习经常需要学生的合作，不仅因为在自主学习进程中很多问题是学习者本身不能解决的，需要他人的帮助，而且有些学习任务也必须通过合作学习完成。具体做法有：
第一，根据测试成绩和教师对学生的了解，学生以3至5人一组被分为若干小组（分为长期合作小组和针对某一学习任务的合作小组）。分组原则为：小组成员应各有特色，有男有女，英语学习能力有高有低。第二，教师可以围绕一个话题给合作小组布置学习任务。第三，合作小组内部进行分工，收集资料，小组讨论，完成各自分任务，然后汇总任务、讨论。第四，得出任务成果。第五，自我评估和教师评估、补充。合作学习的过程比合作得出的成果更重要。合作过程不仅可以增强个体责任感，使学生学会自我评估和合作小组评估，实现资源共享，取长补短，使学习者更全面地认识事物，而且也可以通过这种相互依赖的学习形成相互的心理支撑，减少压力，降低心理焦虑，使学生处于较佳的学习状态。在合作学习的进程中，教师充当参与者、帮助者和评估者的角色，对小组学习过程中出现的困难给予必要帮助并对学习成果进行评估。另外，要根据小组的整体学习情况，奖赏成功的小组。
例如：英语听力课堂上教师要求学生以合作小组的形式收听有关2012年英国伦敦成功举办第30届奥运会的英文报道资料，以演说的形式汇报收听的内容、来源以及对收听的新闻做简单评价和总结。学生的反馈信息中，大多数学生喜欢合作学习，认为合作学习任务对他们来说比自己完成任务更轻松，也更加有动力。有些学生甚至可以给教师提出合理化建议。从学生的情况来看，合作学习受到学生认可和接受的主要原因有：第一，在合作学习中，与教师的帮助相比，更多的是来自于合作伙伴的支持和帮助，而合作伙伴的支持和帮助会增加学习的动力。第二，学习过程中会受到合作伙伴的鼓励和赞扬，而那些“偷懒”的学生则会受到督促和批评。第三，合作伙伴的英语自主学习会对个体产生榜样示范作用。合作小组中英语自主学习能力较强和英语学习成绩较好的学生会在无形中成为学习榜样。
参考文献：
[1]徐锦芬.大学外语自主学习理论与实践[M].北京：中国社会科学出版社，2007.
在做计划的时候，首先要有些原则：
1. 计划的时间不能定的太紧，否则有些意外就不能完成了。比如说，周一晚 8：00-10：00学习英语；10：00-11：00学习语文；11：00-11：30准备睡觉，不如改成8：00-9：30 学习英语，这样如果有些内容到9：30没有完成，可以延长15分钟。
2. 为意外留出时间。每周的计划要为意外留出时间。比如周二晚上学校占用了，需要安排出时间来补这一天的计划。本来这个月的计划已经做好，考试的时候又发现新的内容，更基础的问题，需要时间补。这些都是需要预留时间的。
3. 每周留出总结的时间。检查这个星期计划完成的时间。不要想计划做完了，就没有我们的事情了。我们的工作中，不是也要计划-执行-检查吗？
4. 计划要具体。比如我们确定了这个月重点补习的科目是历史，那么每周完成哪些部分，必须明确。不要让学生花时间去想“今天晚上学什么”。
我们定的目标：
1. 做到一科，二科功课考前不用复习。要认识到，到了实际高考的时候，你是没有时间去复习每一门功课的。坚持做到有一到两门课程每次考试前不复习，如果每次考试成绩都不错，考生在高考的时候就会非常有信心。
2. 没有特别弱的课程，也就是没有落分的课程。
首先，我们把学生目前的水平做一个判断，我暂且分了四档：
1. 入门-不能够完成老师作业的；
2. 初级-刚刚能够完成老师作业的；
3. 中级-能够完成老师作业的，有一定的自由时间；
4. 高级-大部分作业比较容易，多数难题能够解决。
这里讲的是学生总体水平，暂时不要和别的学校的学生比，只考虑你在本校的学习情况。
要把课程也分类：
1. 班里成绩比较好的，能够进入前十名的科目。这些科目考生比较有信心，学习起来也比较有兴趣，也可以从完成作业的时间看。作业能较快做完的，也是学的比较好的。我们称为a类课程。
2. 成绩中等的，作业基本能够完成。这些学科考生认为多花些时间就可以提高。我们称为b类课程。
争取获得优良成绩，能切实在大学里学到丰富的专业知识和基础常识。增加文化素养，提升自身能力，端正学习态度，培养积极勤奋的学风。做学习计划来自我敦促，自我勉励。
二：具体安排
1. 坚持预习，坚持在上课前先预习一遍课文，在上课之前对所上的内容有所了解，能提高听课效率。并且在老师上完一章的内容后，能够主动复习。温故而知新。
2. 每周抽一天时间早起背诵英语课文。
3. 每周坚持到校晚自习
4. 坚持去校图书馆借书阅书，坚持超额完成老师布置的读书任务，并且做好读书笔记。
5. 对于课程知识，要多想多问，并且把其中有收货的部分记入笔记之中。
6. 每个月进行一次学习清算，反思自己这个月是否达成了学习计划，有哪一些做得不足的地方，下个月要注意改进。
7. 订阅英语辅导报，自学报纸上出现的一些英语单词，并且完成报纸上的练习题。
8. 身为一个汉语言文学专业的学生，对于文字的敏感和写作能力是非常重要的，所以应该坚持在平时多写一些练笔。
二年内自学完成汉语言文学专科的全部课程。
二、学习时间
1、预计每周学习7小时，平均每天1小时，根据情况略有调动。
2、快到期末时，复习2周，每周学习14小时，平均每天2小时。
3、在学习当中，我预计主要是利用纸质教材、网络资源进行自学，如遇到问题主动与老师或同学交流。
三、学习内容
完成本专业设立的必修课、选修课和集中实践课程。
四、学习形式
自学为主，在线学习为辅，遇到疑难问题及时上网查相关资料或与带班老师沟通。
五、学习安排
首先全面了解所学的知识内容，视频教学时，认真听教师讲解，充分利用电大网上课堂进行在线学习，把平时在太明白的疑难问题与老师和同学交流，提高自己的学习能力。在学习过程中利用有限的时间学习更多的知识。认真完成课后作业，做好课后复习及考试工作。
六、学习措施
1、每周保证计划的学习时间。
2、制订学习计划时间表。
3、周六、周日协调利用更多的时间进行在线学习。
4、完成电大布置的作业。
七、学习原则
1、循序渐进原则。按照课程要求，由浅入深系统的进行学习。
实践篇：“一日当家”培养自己的理财能力，体验父母当家的感受。其次，跟同学商讨成立“环保小分队”，利用节假日卖报纸，积攒零花钱，捐助读者林，保护母亲河。在新学年里我要摒弃一些不良的习惯，全身心投入学习之中。
点评：实践很重要，细节待完善
对小学生来说，制订自己的学习计划是养成好的学习习惯的基础，吴子昕同学在保证常规学习的基础上，能利用课余时间安排丰富多彩的实践内容，既拓宽了自己的知识面，又提高了阅读理解能力；“一日当家”可积累独立生活的经验，提高了自己的生存技能。另一方面，他开始对作为一个社会公民的责任进行实践，像“捐助读者林，保护母亲河”的行动。在他的计划中注重了知识的积累和习惯的培养，并融合了科学的方法，这是一则简单、实效的学习计划。
温馨提示：长短计划结合，留有自由时间
智力相同的两个学生有没有学习计划，学习效果是不大相同的。合理利用时间，就要善于定计划。制订学习计划要注意：
1、学习计划要有个性。要根据自己的学习情况，生活习惯来制订；计划要全面。思想 、学习、身体是相互影响的。
一、领导重视、提前谋划。开完区里的创建学习型机关的动员会以后，街道党委立刻行动召开街道的动员会，成立了Xx街道创建学习型机关的领导小组，*任组长，同时按照区委创建学习型机关方案的要求，制订了切实可行的《Xx街道创建学习型机关实施方案》。街道领导班子深刻认识到学习型机关对“和谐街道”建设的重要性，通过多次召开专题会议，对机关干部的学习活动提出明确要求，建立了“主要领导负总责，分管领导亲自抓，班子人员配合抓，机关党支部具体抓”的领导机制和工作机制，确保人员到位、责任到位、工作到位。街道班子特别注重学习理念的提升，坚持把学习摆到重要位置，与业务工作一同布置，一同检查，一同落实。要求机关党员干部要人人学习，时时学习，处处学习。党员领导干部坚持带头参加各类学习，带头参加实践活动，发挥表率和示范引领作用。在开展工作中我们重点做到了以下几点：
一是领导示范引领。自开展此项活动以来，街道党委领导班子在自觉学习的基础上，结合分管工作，带头为机关干部、社区干部上党课；党政主要领导坚持在每周五政治学习课上结合当前重点工作和干部群众的思想热点作中心发言，班子其他领导轮流主持学习课程，结合分管工作做重点阐述，对促进干部加强学习，提高分析问题和解决问题的能力，起到了很好的引领作用，为更好的开展学习型机关起到了积极的推动作用。
二是营造学习氛围，健全完善学习机制
（一）是严格学习计划。街道党委领导班子确立全街学习计划，确保班子成员学习在前、领会在前、示范在前。机关党支部定期制定干部学习计划，确定学习重点，向大家提供学习材料；各科室也有针对性地制定相应的学习计划，组织好本科室业务知识的学习；每位机关干部制定好个人的学习计划。使每个部门和每个党员干部学有目标、有方向、有动力。
（二）是建立和完善机关学习制度。将集中学、分散学和自学三者有机结合。街道首先将每周五下午确定为机关集中学习时间，通过采取授课学习、互相交流、观摩电教片、汇报工作等形式，集中学习政治理论、方针政策、上级文件及机关日常工作注意事项；并根据街道工作中出现的新问题、新情况，及时调整、充实、丰富学习内容。许多同志课后都感慨地说：“学和不学大不一样，思想通了，工作的劲头更足了。”分散学习以科室业务知识为主，各科室通过确立学习计划、要点，学习交流本科室工作。街道还实行了科室培训新机关干部、社区干部的带教制，帮助新机关干部、社区干部更快进入角色。个人自学以干部每天读书学习半小时为重点，同时积极鼓励和支持机关干部“八小时以外”的学习，这样就保证了机关干部每周不少于7小时。
街道还利用信息化优势，通过“Xx街道和谐博客”营造学习氛围。建立机关干部《学习园地》，每个干部定期将自己的学习书籍、学习体会和调研文章在学习园地上，起到互相交流学习的目的。自开展学习活动以来，街道干部在《学习园地》上共发表各类学习体会20余篇。使学习成为机关一种经常性、制度性、自觉性的行为。
二、整合资源，丰富学习形式和内容。
一是多载体丰富学习形式。街道党委采用“走出去、请进来”的方式，2010年，街道准备邀请区里领导、基层老党员等专家对“学习实践科学发展观”、“雷锋的生平事迹”进行学习，通过这些活动，为机关干部、社区干部深入领会党的路线、方针政策、创造条件，不仅拓展了机关干部、社区干部学习的深度和广度，更进一步提高了学习的效果。
街道党委领导班子根据机关干部、社区干部的不同兴趣爱好，适时组织各种活动和比赛，使创建学习型机关活动有张有弛，生动活泼。机关干部、社区干部在学习型团队中持续学习，快乐工作，热情参与，创造了内部和谐，发挥了人的智慧和创造力，树立了新型的柔性管理理念，增添了单位的生机和活力。
2.加强运动，提高身体素质。
3.学会做简单的家常菜。
二、暑假学习计划具体方案：
1.针对自己的薄弱学科的学习态度、学习方法、学习目标进行反思，调整。
2.在家长的指导下，写好自己切实可行的暑假生活、学习计划。(安排好每天复习进度的明细内容)
3.把练习卷上做正确的题目进行整理，确认自己已经掌握了哪些知识，具备了哪些运用能力，树立自己对本学科的信心最新中学生暑假学习计划最新中学生暑假学习计划。
4.把练习卷上做错的题目进行整理、抄录，打开教科书，逐题进行分析，找到错误的关键之处，进行认真的订正后，再到教材上找到相关类型的题目，进行练习、强化。(尽可能用自己的力量解决问题)
5.遇到无法解决的困难，按教科书的学习顺序进行梳理罗列。了解自己学习问题的共性薄弱点，然后可以请老师一起帮助解
6.每周二次带着学科的不懂之处和老师一起分析、解决问题。回家后运用老师解决问题的方法进行自我强化练习，填补自己的学习漏洞。(这一点必须按照教材由浅入深的学习顺序，切不可东一榔头西一棒的无序)
7.每次完成习题的订正，将错题订正的全过程，牢牢地记在脑海里(背出)，渐渐地形成解题方法的量的积累
